一、小鼠粪便采样总体原则 1)采集容器应干净无菌; 2)采集器具应使用一次性无菌用品; 3)可以采用应激排便收集粪便; 4)采集的粪便应收集于带盖无菌离心管内; 5)收集的样本应立即-80℃保存(收集的样本可置于干冰上转移至-80℃),干冰运输; 6)粪便样本采集在一天的同一时段进行(最好是早晨),避免微生物组成在同一天不同时间内发生变化。 方法一:代谢笼收集粪便(资料来源:BIOVANO CHINA) 代谢笼:粪尿分离装置。用于收集实验动物自然排出的尿液,是一种特殊设计的为采集实验动物各种排泄物质的密封式饲养笼。除了尿液外,通过特殊设计可以收集粪便、采集呼出的二氧化碳。 a)代谢笼粪尿分离原理 ——粪尿分离漏斗 b)适用领域 1)生物化学 2)生理学 3)营养学 4)药代动力学 5)毒理学 c)收集效果图 d)使用代谢笼的优势 1)所有关键部件均为疏水性聚甲基戊烯(PMP)材料,确保完全分离,不挂壁; 2)可长时间收集(24~48小时)独特的漏斗和锥形体设计,可以将粪便和尿液分离收集到笼外的收集管中,不会互相污染,因此分离是直接和完全的。集尿管有防蒸发设计,单个小鼠也可以收集。 e)使用代谢笼的劣势 1)采集装置成本过高; 2)仅为采集粪便,大材小用; 3)适用于同时有其他领域(毒理学、生化、营养、生理)研究需求的人使用。 方法二、应激性排便 采集步骤: 1)固定小鼠,将其尾部提起; 2)用手指轻轻按压小鼠下腹部; 3)收集新鲜粪便于对应编号的若干无菌EP管中; 4)每管分装2-3颗; 5)-80℃保存,干冰运输。 方法三、自然排便 准备材料: 1)无菌牙签或镊子; 2)高压灭菌后的微隔离器空笼子或无菌干净的小鼠笼子; 3)1.5mL无菌EP管。 采集步骤: 1)贴标签并标记(针对每一只大鼠&小鼠); 样本ID;处理组别;其他需要关联该样本的信息 2)将个体小鼠放置于高压灭菌或无菌的小鼠笼子中(无需垫料); 3)允许大鼠和小鼠自然排便,用牙签或无菌镊子收集排出粪便于1.5mL无菌EP管中,小心闭合管 盖,更换牙签或镊子进行下一次采样,直至所有老鼠粪便收集完成; 4)带有粪便的管子立即至于-80℃ 保存,并可长期保存; 5)需要长途运输样本,采用足够的干冰进行运输,确保样本始终处于冷冻状态。 |
|
来自: Mobio_Lab_Sun > 《微生物多样性》