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实验室里... 师兄！怎么办？我筛了各种诱导条件，但是蛋白全在包涵体里，我太难了！ 换了很多都不理想，现在用的是his标签，分子量小，纯化成本还低。师兄，你快帮我想想办法吧！  给你推荐一款新型镍柱和纯化试剂盒，可以兼容高浓度的变性剂，这样就可以用高浓度变性剂溶解包涵体进行蛋白纯化啦！啊，原来的是碧云天推出的His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型)呀~不愧是大师兄，这下我的蛋白有救啦！
P2229S His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) 碧云天生产的His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型)，采用了新型的BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)，可以兼容高浓度变性剂(8M尿素或6M盐酸胍)，能简单、快速、灵活、高效并且高特异性地在非变性或变性条件下纯化His标签蛋白。 优质镍柱，亲和力强、选择性高、结合容量大 BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)对His标签重组蛋白的亲和力强、选择性高、结合容量大，最大蛋白结合量为25-35mg蛋白(分子量为~55kD)/毫升凝胶。可用于简单、快速、高效地纯化细菌、哺乳动物细胞、昆虫及杆状病毒等多种表达系统中表达的His标签重组蛋白。 用途广泛，非变性和变性条件都可以使用 本产品可以耐受8M尿素或6M盐酸胍，可用于非变形条件和变性条件下His标签蛋白的纯化。本试剂盒提供了非变性和变性条件下纯化His标签蛋白所需的不同的裂解液、洗涤液和洗脱液，可以很好地满足不同实验的需要。 变性条件溶解性好，洗脱样品可以直接PAGE检测 试剂盒配套提供的变性裂解液、变性洗脱液和变性洗涤液中均含有8M尿素，可以有效促使蛋白变性和溶解；最终洗脱下来的目的蛋白无需透析即可用于PAGE检测。最终纯化获得的目的蛋白可以通过透析去除尿素后用于后续特定用途。 使用便捷，提供了空柱管和配套试剂 试剂盒提供了His标签蛋白所需的相关试剂和亲和层析柱空柱管，为His标签蛋白的纯化带来了极大的便利。 非变性条件下纯化效果图： 图1. 非变性条件下His标签重组蛋白纯化效果图。M: marker (P0076); CL：细菌裂解液(cell lysate)；FT：上样穿流液(flow through)；W1-W3：非变性裂解液洗涤1-3 (wash 1-3)；W4-W8：非变性洗涤液(非变性裂解液添加20mM咪唑)洗涤4-8(wash 4-8)；E1-E4：洗脱液(非变性裂解液添加250mM咪唑)洗脱1-4 (elution 1-4)。注：实际的电泳结果会因样品、上样量等的不同而有所不同。 变性条件下纯化效果图：
图2. 变性条件下His标签重组蛋白纯化效果图(本试剂盒所用变性剂为8M尿素)。M: marker (P0076); CL：细菌裂解液(cell lysate)；FT：上样穿流液(flow through)；W1-W3：变性裂解液洗涤1-3（wash1-3）；W4-W8：变性洗涤液（变性裂解液添加20mM咪唑）洗涤4-8(wash4-8)；E1-E4：洗脱液（变性裂解液添加250mM咪唑）洗脱1-4(elution1-4)。注：实际的电泳结果会因样品、上样量等的不同而有所不同。 若需使用盐酸胍作为变性剂，可选择P2233 BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型)镍柱，自行配制含盐酸胍的裂解液、洗涤液和洗脱液。 纯化效果如下
图3. 6M盐酸胍变性条件下His标签重组蛋白纯化效果图(所用溶液均含有6M盐酸胍，各样品电泳前通过透析除去盐酸胍)。M: marker (P0076); CL：细菌裂解液(cell lysate)；FT：上样穿流液(flow through)；W1-W3：变性裂解液洗涤1-3 (wash 1-3)；W4-W8：变性洗涤液(变性裂解液添加20mM咪唑)洗涤4-8(wash4-8)；E1-E4：洗脱液(变性裂解液添加250mM咪唑)洗脱1-4 (elution 1-4)。注：实际的电泳结果会因样品、上样量等的不同而有所不同。
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2229S/P2233可用于非变性条件和变性条件下His标签蛋白的纯化。 如需在强还原剂如DTT/β-巯基乙醇或螯合剂EDTA/EGTA存在的条件下纯化蛋白，推荐使用碧云天的耐受还原剂和螯合剂的P2210/P2218/P2220 BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型)及对应的P2226 His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型)。 |
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