增殖——科研界家喻户晓的一表型,今天就聊聊细胞增殖这些事儿...... 所谓增殖,就是医学基础研究中最常见的表型,而对于该表型可从分子、细胞、组织、动物四个层面上进行相关的检测。 解螺旋专门针对这个表型,梳理增值表型相关的知识,包括标志物、研究方法、研究策略等,致力让大家更好更快的掌握科研的规律。(文末查看资源领取方式) 一、检测 通常检测细胞增殖的方法以下三种,其中MTT以及Brdu法都属于End-point assay(终点分析法),因为这类技术对于细胞都有破坏作用,检测过程中细胞已经死亡,结构也不再完整。 (1)MTT比色法 (2)Brdu染色法 (3)RTCA(实时细胞分析法) 二、样本 临床上常见的组织样本有两种:石蜡切片以及存放于液氮中或者深低温冰箱(-80度)中的新鲜组织样本。通常可从新鲜组织样本中获取蛋白、mRNA、lncRNA样本,用于后续的western或qPCR实验,而石蜡切片因经过复杂的处理,只能从中提取出质量比较好DNA样本和miRNA样本。 值得注意的是,取样时要注意区分癌组织和癌旁组织,避免后续检测结果中因组织的混入而带来实验的误差。 三、模型 肿瘤研究中,最常用的动物模型是移植瘤动物模型。其优点是接种一定量瘤细胞或无细胞滤液(病毒性肿瘤)后,可以使一群动物带有同样的肿瘤,生长速率较一致,个体差异较小,接种存活率近100%。 以此检测增殖表型时,需要记录移植瘤的大小/体积,重量等参数。同时,也可将动物的移植瘤样本进行组织切片或匀浆抽提出总蛋白/总RNA来检测增殖相关的分子标志物的表达变化。 四、资源展示 视频截图 截图 |
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