稳转株建了半年？别怪我没提醒你！

稳定转染，即进入细胞的质粒整合入细胞基因组中，并能随细胞分裂稳定传递下去。这是相对瞬时转染而言的。

瞬时转染的表达时间短暂，外源基因导入整合基因组的几率非常低，绝大部分以游离形式存在，不能随细胞分裂而一同复制，导致最后拷贝数被稀释，无法达到持续表达外源基因的目的。一般用转染试剂进行质粒转染，多为瞬时转染。

一般如下情况需要构建稳定株：

1) 长期在目的细胞中研究基因功能，通过构建稳定株，可以大大降低频繁转染或者病毒包装的成本，也极大方便实验研究；

2)部分蛋白半衰期极长，瞬时RNA只能干扰表达，无法去除已经表达的目的蛋白，通过构建稳定株可以实现更好的基因干扰效果；

3)瞬转往往会引入极高拷贝数的表达，导致因为人为因素造成实验结果的不精确，构建稳定株可以帮助筛选拷贝数适量的细胞进行实验研究；

4)需要用诱导表达系统的，主要是一些致死基因或者是需要时空表达的；

5)需要用细胞做动物实验的，比如裸鼠成瘤等，往往需要构建成稳转株。

构建稳定株的方法：

其实用脂质体转染、磷酸钙转染法等理论上是可以构建稳定株的，但这些方法整合入基因组的效率极低，很难成功。而慢病毒可以携带外源基因随机整合进基因组，效率很高，是建立稳定株的最优方式。

构建稳定株的注意点：

稳定株构建是个长期过程，从质粒构建到慢病毒包装，再到细胞感染及后期的筛选，每一步都至关重要，所以建立稳转株花个半年时间，也是常有的事，而且要承担病毒包装不成功，细胞感染效率低等风险。

所以，想要短期内高效构建出稳定细胞株，汉恒生物提供的“三严”稳转株构建服务，是您的最佳选择！7月构建有高颜值蓝牙键盘和beats蓝牙耳机相送哦~

汉恒生物“三严”稳转株：

1

种子优良--严选低代数细胞来源，无支原体无黑胶虫；

汉恒生物所有的细胞均从中科院细胞库购买，代数低无污染，可提供STR检测报告

2

性状稳定--严酷的筛选及靶基因表达验证体系；

汉恒生物所有的稳转株都采用RT-qPCR验证，保证表达水平

3

活力无损--严格的建系后连续3代细胞增殖活力评价