选修1专题2测试题——土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1．小明欲从土壤中分离尿素分解菌，请回答下列问题：

(1)土壤中的有些细菌能分解尿素，是因为其能合成_________。 

(2)选取土样后进行一系列稀释，吸取0.1 mL的10⁶倍稀释的菌液在灭菌板上进行____接种，采用该种接种方法的目的是___________________________。该实验过程中，还设置了一个空白平板，空白平板可起____作用。实验结果显示：平板上的菌落数为123、119、130，则每毫升土样溶液中的活菌数为____个。 

(3)其他同学认为小明的实验结果偏大，可能原因是操作出现错误。为了排除其他同学的质疑，你给小明的建议是________。 

(4)为了鉴定分离出来的菌种是否为尿素分解菌，需要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，根据颜色是否变____来鉴定。 

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【答案】（1）脲酶    

(2)涂布    将聚集的细菌分散成单个细胞，从而获得单个的菌落    对照    1.24×10⁹    

（3）选取同样的土样重复实验，吸取菌液时注意充分摇匀，若两次实验的结果基本相同，则说明没有出现操作错误    

（4）红

2．尿素是一种重要的农业氮肥，但不能被农作物直接吸收，土壤中有一种好氧型细菌能把尿素分解成氨。欲从土壤中筛选出能分解尿素的细菌并予以纯化计数，采用了如图所示的基本操作流程。

请回答下列问题：

（1）有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生______________。

（2）能在该选择培养基上生长的细菌______________（填“一定”或“不一定”）都能分解尿素，若在平板中加入酚红，目的菌落出现的变化是_______________。

（3）筛选得到的菌落可以采用平板划线法进一步纯化,每次划线后接种环必须____________，才能再次用于划线。纯化获得的菌种可以保存在试管中，塞上棉塞或盖上封口膜，不能密封，原因是_____________________。

（4）用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH₂PO₄和Na₂HPO₄，其作用有__________________。（答出两点）

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【答案】（1）脲酶    

（2）不一定    周围指示剂变红(或周围出现红圈)    

（3）灼烧并冷却    细菌有氧呼吸需要气体流通    

（4）为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中PH稳定  

3．微生物培养与分离技术是生物学中重要的实验技术。根据有关微生物的知识，分析回答问题：

（1）培养基的制备需要经过计算→称量→溶化→ _________→倒平板，若所用培养基为固体培养基，则应该加入_________，熔化时需要边加热边搅拌，原因是_________________________。

（2）分离纯化后对细菌进行计数，一般采用__________________（方法）接种，此种方法估算值往往比实际值偏_______。

（3）微生物纯化培养过程中，无菌操作至关重要，操作是否符合无菌要求，可以通过观察_______________。

（4）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应以尿素作为唯一的________，培养基中加入________指示剂培养后，若变红则其中含有所需细菌。

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【答案】（1）灭菌    琼脂    防止琼脂糊底，使烧杯破裂    

（2）稀释涂布平板法    小    

（3）培养基上生长菌落的颜色、形状、大小、隆起程度是否一致    

（4）氮源    酚红

4．为了从土壤中分离获得尿素分解菌的单菌落，某同学设计了A、B两种培养基其成分如下表所示。请回答下列相关问题：

项目	葡萄糖	KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	尿素	琼脂	水
培养基A	＋	＋	＋	＋	－	＋	＋
培养基B	＋	＋	＋	＋	＋	－	＋

注：“＋”表示有，“－”表示无

（1）培养基中的葡萄糖能为细菌的生长繁殖提供___________和___________，通常情况下，制备培养基时要根据所培养微生物的不同来调节培养基的pH，其原因是______________________。

（2）据表判断，培养基A___________（填“能”或“不能”）用于分离获得尿素分解菌的单菌落，原因是___________；培养基B不能用于分离尿素分解菌，原因是______________________。

（3）若要统计样品中活菌的数目，可选用___________法进行计数。

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【答案】（1）能量    碳源    不同微生物生长繁殖所需的最适pH不同    

（2）不能    该培养基缺少氮源，尿素分解菌不能获得氮源而无法生长繁殖    该培养基没有凝固剂，是液体培养基，不能将目的菌分散成单个细菌而无法获得单菌落    

（3）稀释涂布平板 

5．小明欲从土壤中分离尿素分解菌，请回答下列问题：

(1)分离并计数尿素分解菌时，需要配制以尿素为唯一氮源的__________ (填“固体选择”“液体鉴别”“固体鉴别”或“液体选择”)培养基。

(2)选取10g土样后进行一系列稀释，分别吸取0.1mL的10⁴、10⁵、10⁶倍稀释的菌液在灭菌板上进行__________接种，接种前至少要准备__________个灭菌平板。实验结果显示：10⁶倍稀释的菌液对应平板上的菌落数为124、118、109，则每克土样中的活菌数为________个。

(3)其他同学认为小明的实验结果偏大，可能原因是操作出现错误。为了排除其他同学的质疑，你给小明的建议是______________________________。

(4)为了鉴定分离出来的菌种是否为尿素分解菌，需要在以尿素为唯一氮源的培养基中加入__________，根据颜色变化判别。

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【答案】（1）固体选择    

（2）涂布    10    1.17×10⁸    

（3）选取同样的土样重复实验，吸取菌液时注意充分摇匀，若两次实验的结果基本相同，则说明没有出现操作错误    

（4）酚红指示剂  

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