卒中专栏 | 银杏内酯注射液和银杏内酯ABC对血小板活化因子诱导的家兔血小板聚集作用比较

研究证明，银杏内酯注射液能够抑制家兔中血小板活化因子（PAF）诱导的血小板聚集，抑制血小板活化，且高剂量（1.02 ml/kg）作用最强。银杏内酯注射液的有效成分是白果内酯和银杏内酯ABC，银杏内酯早在1985年就已被发现是PAF受体的拮抗剂，白果内酯具有神经血管保护作用，但对PAF拮抗作用报道较少。

本研究旨在观察银杏内酯注射液、银杏内酯ABC、银杏叶提取物注射液（EGb761）对血小板活化因子（PAF）诱导的血小板聚集的效果及抑制率比较，研究白果内酯和银杏内酯是否具有协同抗PAF作用。

材料与方法

将日本大耳兔随机分为对照（生理盐水）组、EGb761（1.02 ml/kg）组、银杏内酯ABC（5.13 mg/kg）组、银杏内酯注射液（1.02 ml/kg，以萜内酯计5.1 mg/kg）组、白果内酯（5.13 mg/kg）组，分别静脉注射相应药物，每天给药1次，连续给药7 d。

给药结束后，家兔心脏取血，观察PAF诱导下血小板聚集率；电镜观察血小板超微结构；试剂盒法观察PAF诱导下血清中血小板因子-4（PF-4）和β-血小板球蛋白（β-TG）含量。

结果

1. 血小板聚集实验

在PAF诱导下，与对照组比较，EGb761组、银杏内酯ABC组、银杏内酯注射液组的血小板聚集率均显著降低（P＜0.05、0.01）；而白果内酯组与对照组比较无统计学差异。结果表明，银杏内酯注射液组、银杏内酯ABC和EGb761组均对PAF诱导的血小板聚集产生抑制作用，血小板聚集抑制率：银杏内酯注射液（43.76%）＞银杏内酯ABC（35.3%）＞EGb761（26.52%）＞白果内酯（5.48%）。结果见表1。

 2. 血小板电镜检测结果

在2000倍的扫描电镜下主要观察到4种血小板形态：圆形、树形、展平形和聚集形。在PAF诱导下，EGb761组、银杏内酯注射液组、银杏内酯ABC组的血小板大小较一致，表面光滑，聚集型血小板较少见。对照组和白果内酯组红细胞可粘附在血小板上，血小板形态不规律、体积增大、伸出伪足、聚集形血小板数增多。结果见图1。

通过计数分析，与对照组比较，EGb761、银杏内酯ABC、银杏内酯注射液组圆形、展平形血小板比例显著增加（P＜0.05、0.01），聚集形显著降低（P＜0.01），结果见表2。

3. 血小板PF-4和β-TG检测结果

与对照组比较，银杏内酯ABC及银杏内酯注射液组PF-4水平显著降低（P＜0.01）；EGb761、银杏内酯ABC及银杏内酯注射液β-TG水平也显著降低（P＜0.01、0.05）。PF-4和β-TG水平降低，说明血小板释放功能受到抑制。见表3。

讨论

动脉粥样硬化、动脉血栓及其他的心脑血管疾病的发生发展都与血小板的活化相关，因此抗血小板聚集药物在防治相关疾病中发挥着越来越重要的作用。常见的抗血小板途径有花生四烯酸（AA）、二磷酸腺苷（ADP）和PAF途径。

AA途径主要通过抑制环氧化酶，从而不可逆地抑制血小板血栓A2（TXA2）的合成，代表药物为阿司匹林；ADP途径通过改变血小板膜结构，阻断纤维蛋白原与膜上糖蛋Ⅱb/Ⅲa的相互作用，从而抑制ADP诱发的血小板聚集，代表药物为氯吡格雷。阿司匹林和氯吡格雷被多个指南推荐并广泛用于临床，但部分患者会发生抵抗，使药物效果不明显且增加卒中严重性和梗死面积，这就需要考虑选择替代药物或联合用药。

PAF是一种具有生物活性的脂质递质，在体内有着类似激素的生物活性，它存在于血小板聚集机制的最前端，是不依赖AA和ADP诱导血小板聚集的第三条途径。早前研究发现，银杏内酯是PAF的拮抗剂，其中银杏内酯B活性最强。

本实验发现，银杏内酯注射液（48%白果内酯和51%银杏内酯ABC，以萜类内酯计剂量为5.1 mg/kg）通过PAF途径发挥抗血小板聚集作用，作用强于银杏内酯ABC（剂量为5.13 mg/kg）及银杏提取物，从而证明白果内酯与银杏内酯ABC具有协同增效作用，这与Maerz等结果一致。协同作用机制可能是白果内酯剂量依赖性地下调PAF受体mRNA的表达，而不影响PAF乙酰水解酶，从而整体下调PAF的信号转导作用。

此外本次研究结果显示，银杏内酯注射液对PAF诱导后的血小板PF-4和β-TG水平有明显抑制作用，而EGb761降低β-TG作用不明显。PF-4和β-TG均存在于血小板α颗粒内，当血小板受到刺激被激活时从血小板中释放出来。β-TG和PF-4同时升高说明血小板被激活的可能性较大。

综上所述，银杏内酯注射液能显著抑制PAF诱导的血小板激活，作用强于银杏内酯ABC，可能是白果内酯发挥了协同增效作用。

文献来源：

季传平, 徐露, 李慧琴. 银杏内酯注射液和银杏内酯ABC对血小板活化因子诱导的家兔血小板聚集作用比较[J]. 药物评价研究, 2018(41): 1174-1178.

—END—

看完记得关注点“在看“❤️

编辑 | 董晓慧

审校 | 丁慧鑫