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【衡道丨干货】2020 CSCO淋巴瘤病理诊断指南共识(1)

 CandyMint 2020-11-05

2020 CSCO诊疗指南中病理相关专业内容,近期将在衡道病理呈现。敬请关注!

今天带来淋巴瘤病理诊断第一部分的内容。

1、淋巴瘤的分类与诊断原则

目前,淋巴瘤的类型区分和诊断标准主要是依据世界卫生组织(WHO)制定的造血和淋巴组织肿瘤分类。WHO分类认为不同类型或亚型的淋巴瘤在其形态、免疫表型、遗传学以及临床表现等方面各自具备独特的特征。对这些疾病的识别,也相应建立于对上述参数全面评估、综合判断的基础之上。淋巴瘤病理诊断整合了组织形态免疫组织化学染色流式细胞分析细胞遗传学以及分子生物学等多种辅助检测技术。

迄今为止,组织病理学检查仍然是绝大部分淋巴瘤病例的确诊方法,而免疫组织化学染色则是判断肿瘤免疫表型以及检测部分遗传学异常的重要手段。所以,几乎所有淋巴瘤病例均需接受包括免疫组化在内的组织病理学检查之后方能确诊,部分病例的诊断和鉴别,还需辅以其他必要的检测技术。

独特的临床特点也是某些类型淋巴瘤确诊的重要依据,申请病理检查的临床医师有义务通过填写病理检查申请单提供必要的信息(包括患者的年龄、性别、活检部位等一般信息以及临床表现、影像学、内镜和其他实验室检查的主要阳性发现、既往诊断、治疗史等)。病理医师也可通过查阅电子病历、直接与临床医师沟通或参加多学科讨论等多种形式获得相关信息。

2、活检与制片

2.1 标本获得 

淋巴瘤首次病理诊断必须依据切除或切取活检(包括钳取、空芯针穿刺等)所获得的组织标本做出。足量、合格的诊断性组织是对淋巴瘤进行形态观察以及开展免疫表型和遗传学研究的物质基础。对于不适合做组织学评估(例如:严重的器械性损伤或大量坏死而导致诊断性组织过少)的标本,应建议重复活检。淋巴结或某些结外病灶的完整切除标本,有助于病理医师对整个病变进行全面评估,且有足量的组织用于辅助检查,是诊断淋巴瘤最为理想的标本。如有多个解剖区域的淋巴结病灶,一般宜选择颈部病灶。

手术时应注意选择最有代表性的淋巴结予以完整切除。手术动作宜轻柔,尽可能避免组织因牵拉、钳夹等造成机械性损伤。对于难以完整切除的病灶,可通过开放手术、内镜下活检或空芯针穿刺等方法获得小块组织样本供病理学检查,多数也能满足诊断需要。空芯针穿刺也是胸、腹腔等深部病灶活检最常用的方法。

一般而言,细针吸取细胞学检查不能作为淋巴瘤的首诊依据,但可用于淋巴瘤疑似病例的初筛以及部分确诊病例可疑或复发病灶的确认,在某些特定情形下(例如:非实体性淋巴肿瘤、体液标本或获得病变组织较为困难时),细胞学检查亦可用于疾病诊断,但通常需辅以细胞块制作、免疫组化、流式细胞或细胞遗传学分析等辅助检查。

2.2 组织处理

原则上,所有淋巴结或体积较大的淋巴瘤组织标本均应在新鲜、湿润状态下尽快(离体30分钟以内)送到病理科进行处理,不能及时送检的标本可用生理盐水湿纱布包裹后放置4 ℃冰箱短暂保存。病理科在接收标本后应予尽快处理。

较大的淋巴结标本应垂直其长轴做平行切分(每片组织厚度0.3-0.5cm),小于1cm的淋巴结可沿淋巴结长轴最大面对剖。可先行快速病理检查(冰冻切片或印片)以初步判断是否淋巴造血组织肿瘤,对于疑似淋巴瘤的病例,应选择1-2片最大的组织标本浸于4%中性甲醛溶液固定,固定时间通常为12-24小时。及时和适当时间的固定是制作高质量淋巴瘤组织切片的重要前提,不但有利于形态观察,还能较好地保存各种蛋白抗原和核酸物质,从而有利于后期免疫组化和分子生物学检测工作的开展。

剩余的组织可分别用于生物样本库存档、流式细胞分析、细胞遗传学检查、病原微生物检测等。对于非淋巴瘤或疑似感染性病变的标本,应尽快将所有组织固定。对于体积较小的切取、钳取或穿刺活检标本,则应先行固定,然后再送病理科检查。对于骨髓活检标本,还应在固定后进行脱钙处理。标本组织在固定后还需进行脱水、透明、浸蜡、包埋等程序化加工才能制作切片,上述组织处理步骤目前多在自动组织处理仪中完成。 

2.3 切片制作

高质量的常规苏木精-伊红(HE)染色切片是淋巴瘤病理诊断的重要依据。实践中,许多“疑难”病例之所以诊断困难,实际是因为制片质量不佳所导致。HE染色切片质量优劣与否,取决于组织处理、切片、染色、封固等诸多技术环节的质量控制。其中,及时而充分的固定、浸蜡前彻底脱水以及封片前透明这些步骤尤为关键。需强调的是,二甲苯透明的步骤切不可用风干操作(包括电吹风)代替,因为后者会导致细胞收缩而影响形态观察。

切片厚度以2-4um为宜。一般而言,小细胞性病变切片宜薄,大细胞性病变切片不妨略厚些;观察细胞形态切片宜薄,而观察组织结构切片不妨略厚些。概括而言,一张高质量的切片应该达到组织固定良好、组织平整、无刀痕或气泡、染色鲜艳、组织及细胞结构清晰、封固良好等技术要求。

术中冰冻切片检查对于初步区分淋巴瘤与非淋巴造血组织肿瘤有一定价值,但通常不足以确诊淋巴瘤。通过冰冻切片检查还能及早发现标本组织有严重变性、坏死、钙化等可能会影响诊断的因素,从而确保活检标本适用并足以作出明确诊断。淋巴瘤印片检查是组织切片检查的有益补充,以其方法简便、操作快捷而常被用于淋巴瘤的快速筛查。

温馨提醒:明日将带来第二篇——「组织病理学检查的相关内容!


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