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基因定点突变即按照设计要求,使基因的特定序列发生插入、删除、置换和重排等变异。利用PCR等方法向目的DNA引入突变。定点突变能迅速、高效低提高DNA所表达的目的蛋白的形状及表征,使基因研究工作中的有效手段。体外定点突变的方法包括:寡核苷酸介导的定点突变、PCR介导的定点突变以及盒式突变。
实验流程
1.设计带有目的突变序列的引物
2.以待突变质粒为模板,进行PCR扩增
3.少量得到的未突变质粒可用Dpn I 进行消化(识别甲基化的序列,只在为突变质粒终出现)。
来自: 生物学渣 > 《表观遗传学》
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