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宠医客-宠物医生提高医疗技术的首选学习平台～ Rose E. Raskin, DVM, PhD, DACVP Professor Emerita of Veterinary Clinical Pathology Department of Comparative Pathobiology College of Veterinary Medicine Purdue University West Lafayette, Indiana 宠医客编译，如需转载请与宠医客联系 点击图片查看课程安排 细胞学样本中的囊肿、炎症或肿瘤特征经常还伴有组织损伤的表现，包括出血、蛋白质残渣、胆固醇或钙结晶、坏死以及纤维化。 可以这样区分病理性出血和细胞学采样过程中的血液污染：血液污染的样本中有大量红细胞和血小板，而急性出血的样本中会有巨噬细胞吞噬红细胞的现象，专业名词叫做噬红细胞作用（图2-16A）.在正式报告已处理样本的检查结果之前一定要先仔细分析直接涂片。例如，离心这样的简单操作会使体液产生沉淀涂片，可以激活巨噬细胞吞噬邻近的红细胞，而这在直接涂片上是看不到的（图2-16B）。慢性出血与胞浆内含有降解血液色素的活性巨噬细胞有关——例如蓝绿色至黑色的含铁血黄素颗粒（图2-17和2-18）或黄色菱形血色素晶体（图2-18）。含铁血黄素代表铁蛋白分子或微胶粒的过量聚集。这种形式的铁储存用光学显微镜就能看见，可以通过普鲁士蓝染成蓝色。橙色血晶不含铁并且常常在血红蛋白的无氧降解过程中形成，在组织中或体腔中可能发生这一过程。如果是急性损伤，血肿中常常含有被吞噬的红细胞；如果是慢性损伤，血肿会含有充满含铁血黄素的巨噬细胞。 蛋白质残渣可能会出现在涂片背景中。黏液表现为轻微嗜酸性染色并且看起来没有固定形状（图2-19）。淋巴腺体（图2-20）是一些脆弱细胞的细胞质碎片，一般源于淋巴细胞，呈现为散在分布的稍微嗜碱性的圆形结构。细胞核流Nuclear streaming是指细胞核残体形成的粉色至紫色的线性结构（图2-21），由涂片制备过程中过度操作或取样时样本坏死所导致。无色透明至浅粉色的无固定形态的线性物质是胶原（图2-22A），可能会与血管基质中的纺锤细胞和内皮细胞互相混合。 但是，当这些胶原纤维被破坏时（例如与肥大细胞瘤相关的胶原溶解），脱颗粒嗜酸性粒细胞会释放胶原酶，产生透明粉色的致密胶原束（图2-22B）。淀粉样蛋白是种不常见的病理性蛋白，多存在于多种类细胞构成的组织中。外观没有固定形态，嗜酸性并且像玻璃一样透明，可能与慢性炎症、浆细胞肿瘤或者家族性淀粉样病变有关（图2-22C）。 胆固醇结晶意味着细胞膜损伤和脂质变性，可能在某些细胞学背景中看到。这些扁平的方形结晶一般是透明的，只有在背景染色增强时才会着色——例如用新亚甲蓝染色（图2-23）。这类晶体通常与表皮/毛囊囊肿有关。 坏死和纤维变性可能单独或同时出现于一些细胞学样本中。细胞死亡的特征是细胞轮廓模糊不清以及难以辨别细胞类型（图2-24A和B）。伴随组织损伤的一种修复性反应会增大成纤维细胞的活性。有严重炎症时也经常会发现很活跃的纤维细胞。一定要注意不要将这种反应过度解读为肿瘤，因为与成熟的纤维细胞相比，成纤维细胞可表现出未分化特征，例如开放且成丝状的染色质、突出核仁以及高核质比（见图3-10A）。 除了肿瘤性增生，正常生理情况及修复性反应的情况下可能在细胞更新速率增高时观察到明显的有丝分裂迹象（图2-26 A-I）。外观正常的有丝分裂在增生旺盛的淋巴结和再生骨髓中都很常见。正常与异常的有丝分裂之间的差异请关注APP后面资料。  图2-16A 噬红细胞作用。脑脊液。猫。背景中能看到很多红细胞，还有一个大巨噬细胞，吞噬了许多完整的红细胞。这只猫已确诊感染（滴度1:1600）猫冠状病毒（猫传染性腹膜炎）。噬红细胞作用支持急性出血。（瑞氏染色，高倍油镜）  图2-16B 离心后出现的假性噬红细胞作用。胸腔液。犬。体液的沉淀引起了巨噬细胞吞噬红细胞。这个情况是血液污染，而不是急性出血。并且直接涂片中观察到许多血小板并且没有噬红细胞现象，也支持这一观点。（改良瑞氏染色，高倍油镜）  图2-17 可见含铁血黄素的慢性出血。组织抽吸。犬。在这个毛囊脓肿病灶中有几个泡沫样的巨噬细胞。胆固醇结晶下方的巨噬细胞胞质中有蓝绿色颗粒物质，符合含铁血黄素的特征，这是一种红细胞裂解产物。在左侧边缘的巨噬细胞中有些大而黑的颗粒，可能是含铁血黄素。（瑞氏染色，高倍油镜）  图2-18 产生血红素和含铁血黄素的慢性出血。心包液。犬。血性体液中出现空泡样的巨噬细胞，其中有大小不一的明黄色菱形晶体（血红素），这与血红蛋白在无氧环境中的降解有关。还有几个巨噬细胞中含有黑色颗粒物质，符合含铁血黄素的特征。（瑞氏吉姆萨染色，高倍油镜）  图2-19 黏液。唾液腺粘液囊肿。犬。背景中有淡淡的粉蓝色无形性物质就是黏液。主要的细胞是活化的巨噬细胞或粘蛋白噬菌体。（瑞氏染色，高倍油镜）  图2-20 淋巴腺体。组织抽吸。犬。这个淋巴结样本的背景中有大量蓝灰色的细胞质小碎片，被称为淋巴腺小体，与脆弱的肿瘤性淋巴细胞破裂有关。有一个空泡样的大型巨噬细胞吞噬了细胞残渣，外观呈蓝黑色大分子。（瑞氏染色，高倍油镜）  图2-21 核带。组织抽吸。细胞破裂导致细胞核形成紫色带状物，制片时的人为操作或者细胞太脆弱都会出现这种情况，一般肿瘤细胞比较脆弱。（瑞氏吉姆萨染色，高倍油镜）（图片由佛罗里达大学的Denny Meyer提供）    图2-22 A.胶原纤维。组织抽吸。犬。纤维结缔组织的透明至浅粉色的条带跟真菌的菌丝很像。胶原纤维的边界非常模糊，直径不一，而真菌菌丝的宽度较一致，边界明显。（瑞氏吉姆萨染色，高倍油镜）B.胶原溶解。组织抽吸。犬。嗜酸性粒细胞脱颗粒释放胶原酶导致纤维破裂，随意分布的胶原条带呈现透明的亮粉红色。这种结缔组织损伤通常发生在犬肥大细胞瘤中。肿瘤细胞间散布着嗜酸性粒细胞及其颗粒。（瑞氏染色，低倍镜）C.淀粉样蛋白。组织抽吸。犬。一只患有家族性淀粉样变性疾病的沙皮犬，肝细胞周围有无定形品红物质。（改良瑞氏染色，高倍油镜） 图2-23 胆固醇结晶。组织抽吸。胆固醇的特征是透明的矩形板上有凹角。这通通常与退行性鳞状上皮有关，例如毛囊囊肿。背景中的细胞碎屑或染色剂可能会使晶体更突出。（新亚甲蓝染色，高倍油镜）（图片由罗里达大学的Denny Meyer提供） 图2-24 坏死。组织抽吸。犬。A. 突出的核仁仍然可见，而其他组织已退化为代表坏死物质的深蓝色至灰色的无定形碎片。样本取自局灶性坏死的前列腺癌病例。（瑞氏吉姆萨染色，高倍油镜）B.这例细胞急性死亡的样本中细胞轮廓可见，细胞核肿胀明显。与病例A一样。（瑞氏吉姆萨染色，高倍油镜） 图2-25 A. 反应性纤维增生。组织刮取。猫。口腔肿块伴败血症。图为几个饱满的间充质细胞，呈星状至梭形外观，核仁突出，伴有化脓性炎症。在提示恶性间充质瘤或肉瘤时，炎症反应的严重性值得考虑。注意这里的核带看起来是紫色的（罗曼诺夫斯基水溶液染色，高倍油镜）B.坏死纤维增生。组织抽吸。犬。与肌炎有关的面部肿胀。背景包括无定形灰色物质，提示坏死。一些成纤维细胞提示存在组织损伤后的修复过程。（改良瑞氏染色，高倍油镜） 图2-26 正常的有丝分裂形态。犬。A. 前期和末期。中心的双核细胞处于分裂的前期，细胞核与细胞膜结合；而7点钟方向的细胞处于分裂末期，两极各有一套子染色体。B. 中期。染色体在赤道处排列。C.中期。染色单体是可见的沿赤道排列的个体染色体。D.后期早期。姊妹染色单体断裂，开始把染色体分入两个子细胞。E.后期。出现一圈染色体。F.末期。这两组染色体被拉到有丝分裂纺锤体对立的两极。G.末期晚期。染色体浓缩后，细胞质开始分裂。H.末期晚期和胞质分裂。底部开始分裂的细胞时处于末期，顶部的两个细胞刚刚从完成细胞质的完全分裂，形成两个子细胞。I. 中期和末期。在这张犬黑色素瘤的组织学切片上，注意3点钟方向的中期细胞和9点钟方向的末期细胞。（HE染色，高倍油镜）（图片A-H是一只犬的骨髓抽吸样本；罗曼诺夫斯基水溶液染色，高倍油镜） |
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