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教科书都找不到答案,尿白细胞假阴性的真相究竟是什么?

 孤独不寂寞淡然 2021-02-23

仅供医学专业人士阅读参考

一文读懂,全是干货!

前言

尿干化学法中白细胞膜块所测定的白细胞为中性粒细胞酯酶,该酯酶在中性粒细胞中含量最多,单核细胞次之,淋巴细胞(见于肾移植术后)不含此酶。

但最近遇到的一例尿液中性细胞增高,但干化学却阴性?究竟是什么因素导致的呢?在查阅相关书籍后,竟然神奇的发现书中没有记载,而最终的答案也超乎大家想象。



案例经过



12月13日下午班,在审核尿常规30号标本时,发现尿干化学白细胞阴性,但尿有形成分沉渣计数仪UF-500i却有白细胞?如图1。

尿干化学法:PH 6.5,SG 1.015,余均阴性。

尿沉渣计数:白细胞87.3个/uL,管型11.5个/uL。

图1

将尿液离心、镜检,如图2、3,发现镜下WBC+1/HP,与沉渣分析仪结果符合。

图2,低倍镜下视野,电脑拍摄

图3,高倍镜视野,电脑拍摄

说明:电脑拍摄只能拍摄显微镜某一个区域的视野,故上图中的白细胞在显微镜下会更多。

考虑到尿干化学法中测定的白细胞是中性粒细胞,而显微镜下只能辨别尿中的该细胞为白细胞,却无法区分该细胞究竟是中性粒细胞还是单核细胞、淋巴细胞。于是,滴加酸性溶液(如白细胞稀释液,也就是2%的冰醋酸溶液),如图4、5,可见分叶核,故该患者尿液中的白细胞为中性粒细胞。

图4

图5

既然尿中的白细胞都是中性粒细胞,那为什么干化学法的试纸条却检测不出来?难道尿中有干扰物质?

自此,开启了一段尿液真相的探寻之路·····

鉴别分析

1、最常见的干扰物质:维生素C,但在该患者尿液中维C却是阴性,故最先排除。

2、那会不会是药物的因素影响,如头孢氨苄?进入医生工作站,查询医嘱信息,发现药物医嘱一栏中,有甘露醇、0.9%氯化钠、烟酸、头孢呋辛钠、5%葡萄糖、氨甲环酸,未见头孢氨苄,如图6。

图6

注意:头孢氨苄为第一代头孢菌素,尿代谢率为90%;头孢呋辛为第二代头孢菌素,尿代谢率也为90%。[1]

翻阅检验操作规程第4版和检验教科书,只提到头孢氨苄可导致白细胞假阴性,并未提及头孢呋辛,故暂且不考虑。

3、查阅教科书[2],如图7,影响白细胞假阴性的因素有:蛋白质、维生素C、葡萄糖、头孢氨苄。而本案例中该患者尿干化学蛋白质、维C、葡萄糖均阴性,故排除。

图7

4、查看《全国临床检验操作规程》第4版,如图8,导致白细胞假阴性的因素有:尿中四环素浓度高、维生素C、汞盐、胰蛋白酶抑制剂、草酸盐;1%硼酸;含黏液标本、含淋巴细胞标本。对照该患者尿干化学结果、医嘱信息、镜检结果,均不符合,又一次排除。

图8



柳暗花明



所有可能的因素都被逐个排除,导致是什么在干扰该患者的白细胞结果?镜下WBC+1/HP,尿干化学不可能检测不出来,我们所使用的试纸条并未过期,仪器状态又是正常,一定还有什么细节被自己忽略了。

在操作规程介绍影响尿试纸条结果的因素中,有一小段文字提及(如上图8):本表所收集资料来自几种商品试带的情况。个别试带因所用试剂不同,出现假阴性和假阳性的情况也不同。应注意阅读产品说明书。

一语惊醒梦中人,对啊,还有试纸条的说明书啊,看看是否还有其它被忽略的影响因素。

查看尿干化学试纸条说明书,在检验结果解释一栏中找到关于白细胞的叙述:低比重尿、碱性尿白细胞容易溶解,造成白细胞测定结果比镜检结果偏高。高比重尿、淋巴细胞尿、高葡萄糖尿(55mmol/L以上)及室温较低时(20℃以下)可造成白细胞测定结果偏低或假阴性。头孢氨苄、先锋霉素、四环素均可抑制反应,使结果偏低或出现假阴性,如图9。

图9

对照本案例患者的尿液结果,排除高比重(SG为1.015)、淋巴细胞尿(镜检加酸为中性粒细胞)、排除高葡萄糖尿(葡萄糖阴性),同时也排除说明书中的三个药物,因为患者并未使用。

所有的可能性,逐个被排除,只剩最后一个因素:室温低于20℃!对啊,下午自己在临检值班,把空调关掉了,而尿液分析仪又恰巧在窗口放置,临检窗口的温度早已经下降到与外面温度一致,而当天的温度又是降温非常快的一天。



一锤定音



为验证温度因素是否真正的导致了尿WBC假阴性,于是进行一番试验,在室温低于20℃下,将尿干化学试纸条插入装有患者尿液的试管中,如图10,白细胞膜块颜色不随时间推移而改变。

图10,室温20℃以下

随后将尿液试管放置37℃水浴箱温育1分钟,取出试管,插入新的尿干化学试纸条,如图11,白细胞膜块竟然显色了!

图11

将变色后的试纸条上机测试,结果如图12,WBC+2。

图12

经过千回百转的探寻与验证,最终可一锤定音,导致本案例尿干化学WBC假阴性的“真凶”竟然是温度!



案例分析



1、温度因素对检验项目的影响,我们会惯性思维的认为是生化项目、发光免疫项目、微生物血培养、血常规冷凝集等,这些项目对37℃的要求比较高,而大小便常规检查对温度的要求,往往会被忽略掉。

2、此次发现尿干化学WBC假阴性是由于温度导致的,纯属一次意外的收获,恰好由于自己值班繁忙,关闭了空调。

3、由于较多的实验室在场地设置上,会将二便等临检项目设置在窗口位置,而窗口位置又正好是连接外部走廊的通风口处,这也给低温创造了一个“良好”的影响检验结果的机会。

4、本案例中患者尿常规结果在排除诸多干扰因素后,发现教科书及操作规程均未提及的影响因素,却在试剂说明书找到,这也告诉我们在分析检验结果的真假时,掌握仪器的相关性能和熟悉试剂说明书的优缺点、局限性是必不可少的一门功课。

5、需要引起重视的是,在基层医院实验室,由于空调制热能力不佳,需要格外注意温度对检验项目的影响,如白带常规中的滴虫、大便常规中的滋养体、小便常规中的白细胞,谨防出现假阴性结果,进而误导临床诊疗。


总结

通过此次尿常规白细胞假阴性,发现原来温度也可以是一个影响因素,只是我们经常会忽略或者认为不重要。


参考文献:

[1]丁香园,《多图对比:头孢有四代代代皆不同》,2017-08-04

[2]许文荣,林东红.临床基础检验学技术[M].北京,人民卫生出版社,2015:147

[3]尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程第4版[M].北京,人民卫生出版社,2015:163


本文来源:检验医学网

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