129Xe MRI/19F MRI光学成像显影剂/含硝基咪唑基的水溶性磁共振成像造影剂 与现有技术相比,本文具有以下的明显有益效果: (1)本文使用S75磷脂做膜材料,用胆固醇-PEG2000-RGD分子进行修饰,采用超声和振荡的方法制备纳米乳,其中F-68的添加可以使微乳结构更加稳定,材料便宜易得,制备方法简单并具有良好的生物相容性; (2)本文制备的纳米乳同时作为129Xe MRI和19F MRI显影剂以及光学成像显影剂,是一种129Xe/19F双通道、双模态MRI显影剂; (3)作为129Xe Hyper CEST显影剂,本文纳米乳具有超高的灵敏度高,可在皮摩尔浓度下对肺癌细胞进行MRI成像。通过129Xe MRI和19F MRI以及光学成像证明了该纳米乳对肺癌肿瘤具有较好的靶向性,该显影剂可以应用于肺癌肿瘤的早期MRI诊断。 具体实施方式 下面以具体实施例子,进一步阐述本文。下述实施例仅用于说明本文而不用于限制本文的范围。 实施例1 一种RGD-全氟化碳纳米乳MRI显影剂的制备方法,包括如下步骤: (1)纳米乳的制备:先将40mg的磷脂Lipoid S75和5mg普朗尼克F-68溶解在1mL浓度为5mM、pH=7.4的磷酸盐缓冲液中,然后将0.2g的全氟溴辛烷(PFOB)加入到上述缓冲液中,并在功率为170W超声仪中处理8分钟,再用试管振荡器振荡12分钟,得粗乳液;之后将制备的粗乳液用去离子水稀释20倍,再通过孔径为0.22μm的微孔滤膜挤制2次,得到纳米乳记为NPs; (2)RGD-纳米乳的制备:将1.2mg的胆固醇-PEG2000-RGD加入到3mL步骤(1)制备的纳米乳液中,然后置于摇床上以300rpm的速度振荡1小时得到靶向纳米乳NPs-RGD; (3)荧光标记的RGD纳米乳的制备:向3ml步骤(3)制备的靶向纳米乳中加入浓度为5mg/mL的荧光染料DiI,然后置于摇床上以300rpm的速度振荡1小时,得到DiI标记的RGD-纳米乳。 其中,所述胆固醇-PEG2000-RGD的制备方法为:将21.4mg胆固醇-PEG2000-Mal和5mg RGDyc加入1ml PBS中,室温下置于摇床上以300rpm的速度振荡20小时。然后用截留分子量为1000Da透析袋在超纯水中透析去除未反应的RGDyc分子,经冷冻干燥机冻干得到靶向分子胆固醇-PEG2000-RGD。 将本实施例1制备的NPs-RGD进行动态光散射检测,所得的动态光散射图如图1所示,平均水合粒径为195nm。 将本实施例1制备的NPs-RGD用透射电镜进行扫描,所得的透射电镜图如图2所示,图中可以看出,本实施例制备的NPs分散性好,粒径均一。表面有一层类似膜的结构,说明PFG-RGD分子修饰到纳米乳的表面。 将本实施例1制备的NPs-RGD进行紫外吸收检测,所得的紫外吸收光谱图如图3所示,在275nm处检测到RGD分子特征吸收峰,说明RGD分子成功修饰到纳米乳表面。 将本实施例1制备的NPs-RGD进行荧光发射光谱检测,从图4中可以看出较大发射波长为570nm。 将本实施例1制备的NPs-RGD进行氟谱检测,所得的氟谱如图5所示,PFOB的17个F显示出8组峰。 将本实施例1制备的NPs-RGD进行129Xe NMR谱检测,如图6所示,Xe在PFOB纳米乳中的信号在106ppm处,水溶液中的Xe信号在195ppm。 将本实施例1制备的NPs-RGD进行129Xe Hyper CEST谱检测,如图7所示,106ppm有一个较强的CEST信号,来自于Xe在PFOB纳米乳中的信号。 将本实施例1制备的NPs-RGD分别与正常细胞以及肿瘤细胞孵育之后测129Xe MRI谱图,如图8A所示,肿瘤细胞有较强的CEST信号,显示出很亮的信号。而正常细胞基本没有信号,说明了NPs-RGD对肿瘤细胞有特异性靶向作用。做19F MRI成像结果如图8B所示,肿瘤细胞有较强的19F信号,正常细胞没有信号,再次证明了NPs-RGD对肿瘤细胞的靶向性及MRI成像性质。 T1造影剂 Gd-DTPA Gadolinium-LabeledAlbumin Gadolinium-labeledIgG Gadolinium-labeledProteinA Gadolinium-labeledPolylysine Gadolinium-labeledBSA Gd-BSA-FITC Gd-BSA-RhodamineB Gd-DOTA Gd-DO3A-Butylamine DMPE-DTPA-Gd DTPA-BSA-Gd DPPE-DTPA-Gd DSPE-DTPA-Gd DMPE-DTPA-Gd-DMPE DPPE-DTPA-Gd-DPPE DSPE-DTPA-Gd-DSPE MRI的T1造影剂 产品名称:Gd-DTPA/Gado-DTPA 产品全称:Gadolinium-DTPA 中文名称:二乙三胺五乙酸钆络合物/钆喷酸葡甲胺盐 产品名称:Gd-BSA 产品全称:Gadolinium-labeledbovinealbumin 中文名称:钆-牛血清白蛋白 产品名称:Gd-BSA-FITC 产品全称:Gadolinium-labeledbovinealbumin-Fluorescein 中文名称:钆-牛血清白蛋白-绿色荧光素 产品名称:Gd-BSA-RhodamineB 产品全称:Gadolinium-labeledbovinealbumin-RhodamineB 中文名称:钆-牛血清白蛋白-红色罗丹明 产品名称:Gd-IgG 产品全称:Gadolinium-labeledImmunoglobulinG(bovine),Gd-IgG 产品名称:Gd-ProteinA 产品全称:Gd-ProteinA, Gadolinium-ProteinA 中文名称:钆-蛋白A 产品名称:Gd3O4 产品全称:Gadoliniumoxidenanoparticles 中文名称:纳米钆氧化物 产品名称:PLL-Gd 产品全称:Gadolinium-Polylysine/Gadolinium-labeledpolylysine 中文名称:聚赖氨酸-钆 产品名称:Gd-DOTA 产品全称:Gadolinium-Gadolinium(III)1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetate 中文名称: 钆-大环配体 Gd-p-SCN-Bn-DOTA 产品名称:Gd-p-SCN-Bn-DOTA 中文名称: 钆-大环配体 产品名称:14:0PE-DTPA(Gd),DMPE-DTPA-Gd 产品全称:1,2-dimyristoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-diethylenetriaminepentaaceticacid(gadoliniumsalt) 中文名称: 钆-大环配体-磷脂 产品名称:DTPA-BSA(Gd),DTPA-BSA-Gadolinium 产品全称:DTPA-bis(stearylamide)(gadoliniumsalt) 中文名称: 钆-大环配体-牛血清白蛋白 T2型造影剂-超顺磁性四氧化三铁颗粒(USPIO/SPIO) wyf 04.02 |
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