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慢病毒miR30 shRNA干扰载体系统是用于多种哺乳动物细胞中，高效干扰靶基因表达的方法。当病毒基因组被逆转录并永久整合到宿主细胞基因组时，用户定制的启动子会驱动包含目的基因和一个或多个基于miR30的靶向目的基因的shRNA（shRNAmiR）多顺反子的表达。 shRNAmiR转录物通过胞内micro-RNA途径加工产生成熟的shRNA，促进靶基因mRNA的降解。 与常规shRNA载体（利用RNA聚合酶III启动子如U6介导shRNA的表达）不同，基于miRNA的shRNA干扰载体系统采用了标准RNA聚合酶II启动子，这使得可以运用组织特异性，诱导型或可变强度的启动子进行实验，而组成型U6启动子则无法实现。 RNA聚合酶II启动子具有能够有效转录长转录物的能力，相对于其他干扰载体系统拥有许多额外的优势。首先，多个shRNAmiR可以作为单个多顺反子进行转录，在细胞内加工成成熟的shRNA， 这使得单个转录物能同时干扰多个基因或靶向相同基因内的多个区域。 其次，在该载体系统中，用户定制的蛋白编码基因与shRNAmiR处于相同的多顺反子内，该ORF的表达可用于监测shRNA的转录（如果使用的是荧光/抗性标记）或可用于其他需要共表达ORF和shRNA的应用。 |
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