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将常规质粒载体导入植物细胞原生质体是一种广泛的使用方法，可通过化学转化或电转完成。虽然已经开发了其他基因表达载体系统（如双元载体），但常规质粒基因表达载体仍被大多数实验室使用，这主要得益于其在技术上的简便性以及在植物细胞中的高效转染率。常规质粒载体转染的关键特点是短暂性，并且在宿主基因组中的整合效率非常低（通常小于1%）。 优势 技术简单：可通过化学转染或电转直接将质粒载体导入到植物细胞中，而不需要额外的细菌菌株和克隆步骤。 载体容量非常大：载体总容量可达30 kb，其中质粒骨架只占3 kb，有足够大的容量可以放置客户所感兴趣的序列。 高水平表达：常规质粒转染细胞后，可以产生非常高的拷贝数（每个细胞多达几千拷贝），使外源基因能高水平表达。 不足之处 载体DNA非整合型：常规质粒在细胞里主要以游离DNA状态存在，所以常规质粒转染也称为瞬时转染。然而，质粒DNA也可以以非常低的概率永久整合到宿主基因组中（质粒转染每102~106个细胞可能会有一个细胞的基因组被整合，整合效率取决于细胞类型）。如果将携带了药物抗性基因或者荧光标记基因的载体转到细胞中，在经过扩大和传代培养后，可以使用药物筛选或细胞分选来获得稳定整合了该载体的细胞。 可转染的细胞类型受限：不同类型植物细胞的质粒转染效率差异较大。 基因拷贝数在不同细胞中呈现差异性：尽管成功的转染可以在单个细胞里产生非常高的拷贝数，但不同细胞间却有高度的差异性。在一些细胞中，质粒拷贝数非常高，而在另外一些细胞却是低拷贝甚至没有。 |
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