【原】DAB 显色时间如何把握？

 1.DAB 显色时间不是固定的，主要由显微镜下控制显色时间，到出现浅棕色本底时即可冲洗。

2.DAB 显色时间很短（如几秒或几十秒）就出现很深的棕褐色，这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长，需要下调抗体浓度或缩短抗体孵育时间。

3.若很短时间就出现背景很深，还有可能是你前面的封闭非特异性蛋白不全，需要延长 封闭时间。

4.DAB 显色时间很长（如超过十几分钟）才出现阳性染色，一方面可能说明你的抗体浓度过低或孵育时间过短（最好一抗 4ºC 过夜）；另一方面就是封闭时间过长。