【原】慢病毒质粒常见问题汇总

Q1：逆转录病毒和慢病毒是一回事吗？可以用逆转录病毒包装质粒包装慢病毒吗？

A1：慢病毒是逆转录病毒家族的一部分，通常称之为“逆转录病毒”的是逆转录病毒家族的另一个独立成员——g-逆转录病毒。尽管慢病毒和g逆转录病毒使用相同的基因进行包装（即gag、pol和env），但这些蛋白质的亚型以及病毒的长末端重复序列（LTRs）是不同的。

慢病毒和逆转录病毒包装载体不能互换。虽然差异看起来很微小，但决定了慢病毒和逆转录病毒之间的关键生理差异。慢病毒能够进入一个完整的核膜，能感染分裂细胞和非分裂细胞，而逆转录病毒只能感染分裂细胞。在选择合适的基因递送系统时，需要考虑特定的靶细胞或组织。

Q2：可以使用慢病毒转移载体进行瞬时转染吗？

A2：技术上可以。但是否真的有效，需要看情况。大多数转移质粒使用弱病毒LTR启动子来驱动目的基因的表达。因此，蛋白质表达水平往往比使用专门为瞬时表达设计的质粒载体或病毒转导时要低得多。虽然不理想，但病毒结构的瞬时表达是一个有用的工具，它可以在投入大量时间和资源构建稳定的细胞系之前快速检查结构是否正常。当瞬时表达病毒结构时，需要使用合适的细胞系。一些常见的实验室细胞系，包括293细胞系，用腺病毒蛋白E1A永生化，该蛋白已被证明能抑制HIV-1 LTR的表达。