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【好文共赏】从一个项目设计看如何进行队列研究-肠道菌群 vs 年龄

 微微悦明 2021-12-13

Bian G, Gloor G B, Gong A, et al. The Gut Microbiota of Healthy Aged Chinese Is Similar to That of the Healthy Young.[J]. Msphere, 2017, 2(5):e00327-17.

今天分享的这篇文章发表于2017年的Msphere杂志

关键字:肠道菌群、老年、大队列、16S、测序

小编简单的把文章内容翻译一下

“相比于年轻人的肠道菌群,老年人群的肠道菌群研究相对较少。在本项目中,研究者对年龄在3~>100岁跨度的一千余名中国健康志愿者进行采样和研究。利用16S rRNA宏基因组方法,对不同年龄组别的肠道菌群进行比对。在本研究中,研究者发现,(1)老年健康组的肠道菌群与更年轻的组别的健康人肠道菌群非常相似;(2)20岁之前的年少组别的人群肠道菌群差异更大;(3)在30岁~>100岁各年龄组间,菌群差异不大;(4)男性志愿者比女性志愿者的菌群结构差异更大。”

样本来源:基于年龄共分为8个组。每个组采集自不同的地域。男性和女性样本数基本持平。

注:略微有些遗憾的是,可能是由于采样渠道的限制,Young Soldier这一组仅来自于兰州一地。其他的七个年龄组也全部来自于同属于江苏的镇江、苏州、南通三地。采样略为集中。但瑕不掩瑜,能开展千人以上的大规模研究已经很不容易了。

入组标准:

健康人,调查方法:自述

无吸烟史,无饮酒史,血压稳定,无疾病,过去三月内无抗生素治疗,无个人和家族病史,父母和祖父母皆为80岁后过世。

注:入组标准可谓是非常严格。据文中所述约97%~99%的调查人群不符合要求。较为缺憾的是,如果能有志愿者的医学资料作为辅证就更完美了,例如病历或体检报告等,仅靠志愿者口述,信息准确度较难把控。

实验方法:

(1)采样:发放采样盒,志愿者自采集。定点收集后集中处理。-80度保存。

(2)DNA提取: Power Soil DNA Isolation Kit

(3)测序:16S v4区扩展 (515f/806r)

                    Miseq PE300测序平台测序

注:略为遗憾的是没有采取分辨率更高的v3-v4区扩增。

(4)分析:所有样本按照统一的分析流程处理。分析方法详细说明: http://github.com/ggloor/miseq_bin

先不说结论,从整个实验设计来说,可谓是赏心悦目,突出“标准”

入组标准严格,人群分组合理,男女比例均一,实验方法流程化,分析策略标准化,每个环节都控制的非常到位。可谓是非常优秀的一个科研项目,一百个赞

值得小编在自己的工作中好好学习,也借此和各位同好分享。

关于该文章的具体结果,感兴趣的可以点击“阅读全文”了解。

这里仅用几张图略为简述

(1)各年龄组PCA分析

(2)随年龄增加shannon指数的变化

(3)各年龄组间特定菌属的差异情况

每一天获得一点微小的收获和进步。小确幸的科研也很好。与君共勉!

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Mypathogen

微微悦明

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