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师兄支招!再也不用担心RNA/DNA提取会降解了

 小梦想在努力 2022-03-11

师兄......为什么我不管提 RNA 还是 DNA,总是出现这样或者那样的问题?

说吧!这次又整出什么幺蛾子来了?

师兄

......,我这次没偷懒,一大早过来实验室,收完细胞马上提 RNA 了,到现在午饭都没吃上,刚刚检测完 RNA 又「降解」了!!!(内心万马奔腾)

别急~RNA 提取不仅要尽快处理样本,避免反复冻融之外,整个提取过程都需要避免环境中 RNA 酶的污染,所以从 EP 管到枪头都需要无 RNA 酶。

师兄

就没有什么好办法吗?

办法都也不是没有,你可以试试这样......

师兄

实验中样本的收集和保存是整个流程中关键的一环。这一步处理的好坏会直接影响后续 DNA/RNA 的提取,进而影响实验的准确。最终导致实验分析错误、实验结果重复性差,增加了实验的周期。

因此在采集样本时候必须保持样品的完整性,保证下游核酸提取的质量。在日常的实验中,我们可以关注以下几个方面来避免出现样本问题(文末有核酸提取样本保护剂的免费试用申请哦~福利不要错过)

保证样品的新鲜度

DNA/RNA 的提取要尽量保证样品的新鲜度,收取的样品应该尽快使用提取试剂处理,如果没法及时处理,应该利用液氮或 -80 ℃ 冰箱保存。

避免反复冻融

时间、储存温度和反复冻融都会导致样品稳定性问题。因此处理后的样本需要分装保存,条件允许的情况下,样本分装可以分别保存在液氮和 -80 ℃ 冰箱。后续需要提取 DNA/RNA 时,按需求量取出样品,并立即液氮研磨组织,进行提取。

预防 RNA 酶污染

RNA 比 DNA 更容易降解,因此如果目的是提取 RNA 时,样本处理中需要注意环境中 RNA 酶的影响。因此需要使用 RNase-free 的试剂、无 RNase 的耗材、洁净的手套和操作服,来保证保存过程中 RNA 不受环境影响。

针对样本保存的这一难题,ZYMO RESEARCH 与简石生物将样本采集,保护和核酸提取通过一种试剂 DNA / RNA Shield 来实现。试剂具有以下优点:

 无需复杂的储存条件和收集样本无需冷冻(-80 °C),即使在室温下也可保护样品长达 30 天;

 无惧反复冻融。即使多次冻融样品,也可以很好的保护 DNA / RNA 在采样时的状态;

 兼容性高:与所有 Zymo Research 或简石生物提取试剂盒兼容,该试剂不需要在样本处理前将其去除。只需将结合试剂添加到 DNA / RNA Shield 中的样品中,然后进行纯化(图 1)。

图 1:来自受 DNA / RNA Shield™ 保护的样品的简化工作流程,然后通过 Zymo Research 或简石生物的 DNA 和 RNA 提取试剂盒进行纯化。

DNA / RNA Shield™ 可应用于多种采集容器,以最好地满足不同的样本需求。

该产品包含 DNA/RNA Shield,已获得美国疾病预防控制中心认证,无需担心样本降解,可在采集地保留样品的基因完整性,以进行敏感的下游分析(例如:下一代测序,RT-PCR 等);可保证样本在常温运输中核酸的稳定,无需冷链运输或特殊的设备,样本可以存储在采样管的 DNA / RNA 保护剂中;可有效裂解细胞,灭活各种核酸酶和传染性微生物(病毒、细菌、真核生物),兼容各种样本保存套装。

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搭配仪器

搭配耗材

血液收集管

微生物和组织裂解管

粪便收集管

口腔拭子收集管

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部分产品

关于简石生物

简石生物技术是一家集医用耗材生产,体外诊断试剂,医疗器械生产于一体的高新技术企业,公司研发基地位于北京,生产基地位于浙江,拥有 6,000 平方米的十万级净化厂房,通过 ISO13485 等体系认证,产品获得 CE,FDA 认证,远销欧美等二十多个国家。

疫情期间简石生物积极承担企业社会责任,密切关注疫情进展,员工加班加点生产,全力保障前线的试剂供应,全力支持前线防疫抗灾团队。其中样本保存液,一次性使用采样拭子,病毒核酸提取试剂盒已发往省市疾控中心,疫区一线医院,第三方检测机构等单位助力疫情。

内容审核:崔沙沙、康晋伟

文中图片来源:ZYMO 公司

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