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手把手教学——Trizol法和柱式法RNA提取的实验流程和注意事项。简单来讲就是裂解细胞使RNA得以释放,加之有机溶剂使RNA与DNA、蛋白质分离,并进一步纯化得到RNA的过程。可见三条带,从上往下一般为28s RNA、18s RNA及5s RNA,一般情况下5s的带非常淡,甚至看不清,28s带的亮度应为18s带亮度的2倍,且不存在拖尾,即可证明RNA纯度可以,如若5s很... 阅92 转0 评0 公众公开 24-03-13 18:58 |
【5分钟讲透实验】如何提取高质量的RNA/DNARNA/DNA提取过程中的注意事项。在提取和纯化RNA/DNA过程中,需要去除可能存在的污染物,如蛋白质、盐等,并尽可能地减少DNA和RNA的降解。可以使用分光光度计来测定RNA/DNA的浓度和质量,或者使用凝胶电泳来确认RNA/DNA的大小和纯度.RNA/DNA提取的常见问题及解决方法:如果提取得到的RNA/DNA浓度较低,... 阅202 转0 评0 公众公开 23-05-24 06:00 |
RNA提取少走弯路——新手必读。非常值得一提的是血液(包括血清、血浆、脑脊液、各种拭子或其他液体含量高的样本)RNA的提取用TRIzol和红细胞裂解的方法效果都不好,因为红细胞裂解液不含有RNA酶的抑制成分,这个过程RNA很容易降解,推荐使用TRIpure LS (RP1101)或者血液总RNA提取试剂盒(RP4001),该方法适用于表达谱芯片实验中RNA的提取,并... 阅77 转0 评0 公众公开 22-11-16 11:26 |
各位都知道,提取到质量良好的RNA(包括总RNA和mRNA,以下同)是非常困难,关于RNA的提取技术,我就不说了,为什么呢?2)RNA的电泳图谱 一般的,RNA的电泳都是用变性胶进行的,但是根据我的经验,如果你仅仅是为了检测RNA的质量是没有必要进行如此麻烦的实验的,用普通的琼脂糖胶就可以了。如果两者的条带一致或者无明显差别(当然,它们的... 阅429 转3 评0 公众公开 22-04-22 08:56 |
再也不用担心RNA/DNA提取会降解了。别急~RNA 提取不仅要尽快处理样本,避免反复冻融之外,整个提取过程都需要避免环境中 RNA 酶的污染,所以从 EP 管到枪头都需要无 RNA 酶。RNA 比 DNA 更容易降解,因此如果目的是提取 RNA 时,样本处理中需要注意环境中 RNA 酶的影响。图 1:来自受 DNA / RNA Shield? 保护的样品的简化工作流程,然后通过 Z... 阅313 转0 评0 公众公开 22-03-11 09:06 |
“为什么人家提RNA一提一个准,换了我就是死活提不出来(Orz),难道我就是传说中的RNA绝缘体?”相信怀有这种疑问的小伙伴不在少数,那么RNA提取过程成功与失败的决定因素到底在哪儿呢?3、保证所提RNA质量的关键的一步:加氯仿离心后出现三分层,上中下分别为RNA、DNA与蛋白,分离RNA时需注意防止DNA混入RNA。5、Trizol试剂能迅速破碎细胞并... 阅1423 转3 评0 公众公开 21-11-30 06:13 |
提取RNA的那些小技巧,你知道吗?推荐理由:本公众号全力打造科研实验思路,SCI期刊投稿分析,国自然基金申请,数据统计分析,最新文献研究进展解读及生物医学相关试剂,耗材,仪器等相关信息,为实验工作者提供科研实验思路及科研进展最新信息提供更多的能力提升平台以及实验试剂耗材仪器采购平台!今天给大家带来《qRT-PCR》之---如何提取细... 阅204 转2 评0 公众公开 21-09-13 10:40 |
“生化实验必备—Trizol法提取RNA”Trizol法提RNA因其具有操作简单,回收率高和提取的RNA质量高的优势成为现在普遍运用的一种RNA提取方法。再使用异丙醇沉淀水相中的RNA,乙醇洗涤沉淀中残留的有机溶剂,最终风干得到较纯的RNA。4. 关于加样中RNA加多少μl的计算,需要的RNA量为1μg, 比如测出来的RNA浓度为200ng/ul,则需加5ul达到1μg,10ul体... 阅6205 转26 评0 公众公开 20-09-25 21:27 |
day6trizol法提取RNA全集合(材料-步骤-原理)好了,今天来讲一下 trizol法提取RNA那些事。Trizol ,氯仿,异丙醇,75% 乙醇(用RNase-Free 水配制), RNase-Free 水,EDTA抗凝管。第一个试剂:TRIzoI,它的功能是使细胞充分裂解,溶解胞内含物,注意这一点就开始使RNA提取更纯的一个初始保证,同时又因为它里面含有RNαse抑制剂(就是RNA酶抑... 阅594 转7 评0 公众公开 20-09-25 21:27 |
Trizol法提取RNA原理及实验步骤(新手详细注释版)RNase酶非常稳定,是导致RNA降解最主要的物质。1)液氮研磨:组织块直接放入研钵中,加入少量液氮,迅速研磨,待组织变软,再加少量液氮,再研磨,如此三次,按50-100mg组织/ml Trizol加入Trizol,转入离心管进行第2步操作。8) 按0.5ml异丙醇/ml Trizol 加入异丙醇(沉淀RNA)混匀,室温放置5-10m... 阅31729 转202 评0 公众公开 20-09-25 21:26 |