Worthington 羟基类固醇脱氢酶催化类固醇的羟基和羧基的相互转化。 睾酮衍生的羟基类固醇脱氢酶有两种类型:3-α-羟基类固醇脱氢酶(α酶)和3-β-羟基类固醇脱氢酶(β酶)。α酶的分子量为47,000道尔顿。α 酶仅氧化 C19、C21 和 C24 系列的 3-α-羟基类固醇。它受到重金属和巯基结合剂的抑制。β酶催化C19和C21系列的3-β-羟基类固醇、C18、C19和C21系列的17-β-羟基类固醇以及某些16-β-羟基类固醇的氧化。它受重金属和还原剂的抑制。睾酮的氧化被 3,17-α-雌二醇和其他 1,3,5-雌二烯衍生物抑制。 羟基类固醇脱氢酶催化类固醇的羟基和羧基的相互转化。来自睾酮假单胞菌的有两种类型: 1. 3α-羟基类固醇脱氢酶(1.1.1.50),(α酶): 公式(上图) 2. 3β-和 17β-羟基类固醇脱氢酶: 公式(下图) 这些酶在类固醇的测定中具有有用的应用(Hurlock 和 Talalay 1958;Stempfel 和 Sidbury 1964;Moore 1972)。它们已用于测定血液中的胆汁酸(Iwata 和 Yamasaki 1964;Palmer 1969;Leslie 1969;Murphy等人1970;Schwarz等人1974)。 应该注意的是,Worthington 提供两种制剂:一种来自常规的睾酮假单胞菌(ATCC 11966) 培养物,它同时产生 α 和 β 酶,另一种来自几乎只产生 α 酶的突变菌株。通过使用两者,可以通过差异确定β-羟基类固醇。 Teller 和 Bongiavanni (1963) 报道了突变菌株对表雄酮的活性只有轻微的活性,表明只有微量的 β 酶。Roe 和 Kaplan (1969) 研究了突变株和野生型菌株的特异性,具体细节应参考该参考资料。 Worthington 羟基类固醇脱氢酶技术说明:STDHP 和 STDH 同时包含 α 和 β 活性。然而,STDHMP 仅包含 α 活性。 单位定义:一个单位在 25°C、pH 9.0 下每分钟减少 1 微摩尔 NAD,使用雄酮或睾酮作为底物。 1、羟基类固醇脱氢酶 从诱导细胞中获得的一种冻干粉末。包含 alpha 和 beta 活动。 储存在-20°C。 2、羟基类固醇脱氢酶 从突变株的适应细胞中获得的纯化粉末。仅对雄酮有活性,对睾酮无活性。 储存在-20°C。 需要特殊运输:冰袋 3、羟基类固醇脱氢酶 一种从诱导细胞中获得的纯化粉末。包含 alpha 和 beta 活动。 储存在-20°C。 需要特殊运输:冰袋 |
|