【原】cart疗法是什么意思？

十年前，一位叫Emily的女孩成为世界上第一个接受CAR-T细胞治疗的患者，并成功治愈了罹患的癌症。

2010年5月，年仅5岁的Emily Whitehead被诊断出患有急性淋巴细胞白血病(ALL)。用尽了一切治疗手段后，Emily的家人决定尝试CAR-T疗法——收集Emily血液中的T细胞并对它们进行基因改造以识别和攻击癌细胞，并将经过修饰的细胞回输至Emily的血液中。而在此之前，CAR-T疗法并未应用于人体临床试验中。这是一个大胆的尝试，也是Emily最后的希望：奇迹发生了，ALL被成功治愈，并且Emily已经健康生活了10年。

Figure 1 10 years cancer free! 

一.通用型CAR-T疗法

CAR-T疗法已经有多款药物先后上市，不管是在疗效还是商业化上，都取得了巨大的成功。但是，使用基因工程构造CAR细胞的成本高昂，国外CAR-T产品的售价高达37.3-47.5万美元，而国内上市的两款药物售价也达120-129万人民币。如此昂贵的售价显然会为很多患者家庭带来沉重的负担。此外，目前自体CAR-T细胞疗法为定制化生产（以患者自体血液中T细胞为材料），从收集患者T细胞到CAR-T细胞到成功制备大概要经历2-3周，对于一些患者来说，这个时间可能会超过他们的最佳治疗时期。因此，研究者开始考虑同种异体CAR-T细胞，即通用型CAR-T（UCAR-T）。UCAR-T最大的优势就是可以提前制备，当患者有需要时可以及时使用，极大地降低了金钱成本和时间成本。

Table 1 已经上市的CAR-T产品。来源：各公司官网、产品说明书

二.UCAR-T的绊脚石：GvHD

移植物抗宿主病（GvHD）是同种异体CAR-T细胞治疗中需要克服的主要障碍[1]，尤其是当患者的CAR-T细胞是由人类白细胞抗原（HLA）不匹配的健康供体产生时，UCAR-T的移植会引起严重的血液学毒性[2]。因此生成UCAR-T细胞的主要设计原则是从同种异体健康供体中生成肿瘤抗原特异性T细胞，然后通过基因编辑的方法破坏同种异体T细胞的TCR基因和/或HLA I类基因来有效消除移植物抗宿主病。通过靶向TCR内源性α或β亚基恒定区的基因组序列或破坏MHC基因复合物的HLA-A基因座，使得TCR或HLA I类抗原的表达被消除，由此产生的T细胞不能识别同种异体抗原，从而消除GvHD[3]。构建TCR缺陷型和HLA I类缺陷型最常用的基因编辑方法有锌指核酸酶（ZFN）、转录激活因子样效应核酸酶（TALEN）和CRISPR/Cas9等。

Figure 2 使用ZEN酶构建通用TCR-/HLA-T细胞[3]

三.SUPRA CAR

为了提高CAR的灵活性和可控性，研究者们发明了一种分体式通用可编程 （SUPRA）CAR系统[4]。SUPRA CAR是一种双组分受体系统，由T细胞上带有亮氨酸拉链接头(zipCAR)的通用受体和带有靶向特定抗原的亮氨酸拉链接头(zipFv)分子的单独scFv组成。这种带有亮氨酸“拉链适配器”的SUPRA CAR结构具有几个优势[4]：

1. SUPRA CARs的活性可以通过多种机制进行精细调节，以限制过度激活；

2. SUPRA CARs可以对多种肿瘤抗原产生反应，提高肿瘤特异性；

3. SUPRA成分可以人源化以降低潜在的免疫原性；

4. SUPRA CAR可以调节多个信号通路或不同的人类T细胞亚型，以增加免疫反应的范围。

Figure 3 SUPRA CAR图示[4]。

四.UCAR-T研发标杆：CELLECTIS

法国企业Cellectis是研发通用型CAR-T细胞疗法的标杆。Cellectis公司已拥有多条UCAR-T研究管线。例如UCART123是一种基因编辑的T细胞研究药物，靶向CD123——一种在急性髓性白血病(AML)的白血病细胞表面表达的抗原。该管线正处于临床I期阶段，预计今年10月完成，旨在确定药物的最大耐受量和最佳剂量。

Figure 4 UCART123图示。来源：Cellectis官网

UCART19则是Cellectis授权给Servier，目前由Servier和Allogene联合开发的项目。该项目使用TALEN技术改造T细胞，其研究成果发表在Science Translational Medicine上[5]，UCAR-T19被用于治疗两名患有复发性难治性急性淋巴细胞白血病的婴儿，并展示了这种使用基因编辑技术进行工程化改造细胞的治疗潜力。

五.结语

UCAR-T因其可以提前制备，并用于同种异体患者中，对比现有的自体CAR-T成产、运输、存储的消耗，可以将成本降低90%，具于广阔的前景和意义。