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脑声常谈丨转棒疲劳实验(rotarod test)学习宝典,从此实验不再难

 脑声常谈 2022-10-23 发布于上海

大家好,我是上海欣软小欣博士,从今天开始我就是上海欣软的产品代言人啦,很快我会以“特殊的方式”和大家见面的(卖个关子),这段时间我正在积极筹划组建“脑声常谈”实验室(BrainTalks-Lab),在我的实验室里,您能够了解很多有用的动物行为实验知识,也能接触到各种最先进的动物行为实验分析软件和测试仪器。另外,偷偷告诉您,小欣马上会以前所未有的方式,分期给您介绍“脑声常谈”实验室(BrainTalks-Lab)。最后,关注脑声常谈,实验不难




实验目的

转棒测试用于评估啮齿动物的运动协调和平衡。动物必须在旋转的杆上保持平衡仪器记录动物从以不同速度旋转或在连续加速(例如从 4 到 40rpm)的杆上掉下来所需的时间(延迟)掉落时杆的速度及动物运动距离


实验设备

鼠为例,转棒尺寸:旋转杆直径约为3cm,由硬质塑料材料制成道宽度约为8厘米。该设备必须允许在 300 秒内从 4rpm 加速到 40rpm。延迟数据传输到计算机,并记录动物落棒的原因(例如跌落、跳跃)


测试方法

在测试当天,应将小鼠关在自己的笼子里,并在测试室中适应至少 15 分钟(适应阶段)。称量每只老鼠并记下数据表上的体重。为了便于在以后的试验中识别,在测试前使用无毒墨水标记小鼠,并在尾巴的底部有相应的条纹记号,然后打开转棒装置。

测试阶段

它由三个试验组成,试验间隔为15 分钟( ITI )。可以在一次试验中连续运行下一批小鼠,然后再进行下一次试验。在测试阶段之前没有培训期。将设备设置为在 300 秒内从 4 转至 40 转的加速模式。仪器显示4rpm恒速的“加速等待”,直到按下启动(Strat)按钮。

测试试验1 (T1):将小鼠放在通道上(如果难以处理小鼠,则在两只小鼠之间留空通道,每次运行仅测量 3 只小鼠)。

试着让杆上的小鼠向前走以保持平衡。杆最初以 4rpm 恒定速度旋转,以允许将所有小鼠定位在各自的通道中。一旦所有的老鼠都“准备好”(即检查它们是否能够以 4 rpm 的速度向前走几秒钟),按下启动(Strat)按钮,杆将在 300 秒内从 4 rpm 加速到 40 rpm。

整个实验过程中转棒仪会自动记录每只老鼠从杆上掉下来的潜伏期、掉落时速度及运动距离,并记录试验结束的原因(坠落、跳跃、被动旋转)。

Tip:如果小鼠紧贴杆一直完全被动旋转,则通过按下控制开关停止该小鼠的计时并记录延迟时间。取出小鼠并将其放回其主笼子中。要非常小心,不要打扰仍在相邻通道上运行的其他老鼠。同时,还要注意转棒仪上其他小鼠的被动旋转。

用水清洗设备,然后用 50% 乙醇,擦干。测试下一组小鼠,重复试验1的测试。


实验笔记

  • 从行为表型获得的结果有效性在很大程度上取决于动物近期饲养的情况。实验前实验人员需要熟悉被测试的动物,以便在测试前降低动物的焦虑水平。

  •  大多数小鼠行为研究都依赖于年龄、性别。在单个实验中保持这些参数的可比性很重要。

  • 体重可能会影响该测试中的表现。因此,考虑体重对于更好地评估数据至关重要。

  • 杆的表面和直径大小是影响该测试性能的主要参数,应严格控制这些参数。

  • 环境因素可能会影响小鼠的焦虑程度。温度、湿度、通风、噪音强度和照明强度必须保持在适合小鼠的水平。必须在测试前后将小鼠保持在统一的环境中,以避免获得异常结果。

  • 在测试阶段之前没有培训期。

  • 建议在一天中大约同一时间进行转棒测试,因为生理和生化参数在一天中会发生变化。

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