近年来，免疫缺陷病、恶性肿瘤、器官移植等患者，以及各类导管留置时间的延长、广谱抗菌的暴露等患者越来越多，侵袭性真菌感染发生率呈现逐年上升的趋势。目前大多数医院都在开展非侵袭性实验室技术如 G 试验（1,3-β-D 葡聚糖）和 GM 试验（glactomannan,GM）对侵袭性真菌感染的高危患者进行筛查检测，以提高真菌感染的阳性率。G 试验是检测真菌的细胞壁中 1,3-β-D 葡聚糖的试验。1,3-β-D 葡聚糖几乎存在于所有真菌细胞壁（除了结合菌和隐球菌）中，当吞噬细胞吞噬真菌后，1,3-β-D 葡聚糖从细胞壁中释放出来，从而导致血液及其他体液（如尿、脑脊液，腹水，胸水等）中 1,3-β-D 葡聚糖含量增高。因 1,3-β-D 葡聚糖可特异性激活 1,3-β-D 葡聚糖检测试剂中 G 因子，引起裂解物凝固，故称 G 试验，其检测方法为比色法或比浊法。
GM 试验检测的是半乳甘露聚糖（glactomannan,GM），GM 是广泛存在于曲霉和青霉细胞壁的一种多糖，菌细胞壁表面菌丝生长时，GM 从薄弱的菌丝顶端释放，是最早释放的抗原，其检测方法为 ELISA。看到这里，你也许会产生疑问，既然 1,3-β-D 葡聚糖几乎存在于所有真菌细胞壁中，那岂不是只要做 G 试验就完全足够对真菌进行检测了。首先 G 试验只能提示有无真菌侵袭性感染，并不能确定为何种真菌感染；其次 G 试验在以下几种情况都会出现假阳性（链球菌血症；使用纤维素膜进行血透，标本或患者暴露于纱布或其他含有葡聚糖的材料；静脉输注白蛋白、免疫球蛋白或凝血因子等血液制品；检测操作者处理标本时存在污染，标本暴露在其他含有葡聚糖的材料中；还有肿瘤患者使用多糖类抗癌药物或放化疗造成食物中的葡聚糖或胃肠道定植的真菌进入血液）。GM 试验主要应用于侵袭性曲霉菌感染的早期诊断，但对其他真菌来说检测阳性率较低。GM 试验存在假阳性，可见于自身免疫性疾病（如自身免疫性肝炎）、饮用含半乳甘聚糖的牛奶等食物、血液透析或者使用了哌拉西林 / 他唑巴坦等半合成青霉素等情况。同时 GM 试验也存在假阴性，可见于下面几种情况：真菌感染入血的数量较少、之前使用了抗真菌活性的唑类药物；非粒细胞缺乏患者等。G 试验可以作为早期鉴别侵袭性真菌病（IFD）的检测方法，在《血液病 / 恶性肿瘤患者侵袭性真菌病的诊断标准与治疗原则》（2020 年，第六次修订版）中 G 试验被推荐用于 IFD 早期诊断的重要筛选指标。同时《中国成人念珠菌病诊断与治疗专家共识》中也指出 G 试验的动态检测十分必要，建议对高危患者每周 2 次动态监测以提高其特异性，并结合临床表现及其他微生物学检查结果综合判断。GM 试验是诊断侵袭性曲霉菌感染的证据之一，在《血液病 / 恶性肿瘤患者侵袭性真菌病的诊断标准与治疗原则》（2020 年，第六次修订版）中，血浆、血清、支气管肺泡灌洗液或脑脊液的 GM 试验阳性可作为曲霉菌感染的微生物标准。曲霉菌感染部位主要集中在肺部，从而引起肺曲霉病，诊断曲霉菌在肺部是定植还是侵袭性生长，关键在于其是否合成 GM。GM 试验阳性常早于患者出现临床症状 5~8 天，比胸部 CT 影像学表现平均早 7 天，可作为早期诊断的重要手段。有文献报道肺泡灌液的 GM 试验对临床诊断肺曲霉病的敏感性高于血液，因此建议临床怀疑肺曲霉病时送检血液标本时同时送检肺泡灌洗液。由于 GM 释放量与菌量成正比，因此 GM 值也可以反映感染程度，作为治疗效果的参考指标之一。1. G 试验和 GM 试验各有优劣，不能互相取代。有研究报道 G 试验的阴性预测值为 96%~99%，可将 G 试验作为 IFD 的有效筛查手段；GM 试验可进一步明确真菌种属。2. 建议 G 试验和 GM 试验连续检测，2 次阳性具有临床诊断意义。但是 G 试验和 GM 试验存在假阳性和假阴性的可能，因此除了进行动态检测以外，仍需结合临床表现综合判断是否存在真菌感染。3. G 试验和 GM 试验二者联合应用以提高对侵袭性真菌病的诊断效率，有研究报道 G 试验和 GM 试验联合检测对 IFD 阴性预测值接近 100%。Q：如何解释 G 试验结果阴性而 GM 试验结果阳性的情况？A：这是由于 G 试验和 GM 试验检测的物质不同，代谢规律存在差异导致的。因为真菌只有被吞噬细胞吞噬后才能将 (1-3)-β-D 葡聚糖释放出来，而半乳甘露聚糖表达在细胞壁，在曲霉繁殖生长的时候由菌丝释放出来。若在感染早期进行 G 试验和 GM 试验，曲霉的生长分泌强于曲霉的死亡消化裂解，就会出现 G 试验结果阴性而 GM 试验结果阳性的结果。同时在粒细胞缺乏患者中，由于粒细胞吞噬真菌释放的 (1-3)-β-D 葡聚糖较少，也会出现 G 试验结果阴性而 GM 试验结果阳性的结果。
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