ERBB2/neu基因是乳腺癌原癌基因，ASCO-CAP指南采用IHC检测确定HER-2状态：0或1 表示阴性，3 表示阳性，若IHC2 ，则进行荧光原位杂交（FISH）检测。最近的临床试验引入了HER-2低表达乳腺癌的概念，HER-2低表达包括IHC 1 、2 且FISH阴性的肿瘤。虽然HER-2低表达状态不被认为是HR阳性乳腺癌患者潜在化疗益处的独立预后或预测标志，但最新证据表明，基因组高风险的患者的总体结果取决于HER-2表达水平的广泛范围。例如，已发现HER-2低表达在总生存期（OS）、侵袭性无病生存(IDF)和无病生存(DDFS)方面比HER-2阴性产生更好的结果。因此，本研究旨在探讨21基因分析法(ODX)检测HER-2基因表达能否进一步区分IHC中的0，1 ，2 /ISH阴性，完善HER-2低表达的标准。收集2021年1月--2023年1月期间229例HR阳性HER-2阴性早期乳腺癌（T1-3 N0-1）病例，通过IHC和ODX描述特征。IHC鉴定的HER-2状态为0（IHC 0）或低表达（IHC 1 和IHC 2 /ISH阴性），而HER-2 0又分为HER-2阴性（IHC 0）和HER-2超低表达（IHC 1-10%）。通过ODX检测的HER-2基因表达低于10.7则为阴性。
图1. 病例选择一览表
研究人群根据HER-2状态分为两组，其中122名患者(53.3%)为HER-2 0，107名患者(46.7%)为HER-2低表达。在HER-2低表达组中，67例患者（占总数的29.25%）HER-2 1 ，40例患者（占总数的17.5%）HER-2 2 /ISH阴性。表1总结了患者初始临床和病理特征，按HER-2 IHC评分分类。表1. HER-2 IHC分类患者的临床和病理特征
除HER-2 0患者的PR阴性比例（13.9%）高于HER-2 2 /ISH阴性患者（5%）之外，两组患者的临床和病理特征无明显差异。很大一部分肿瘤为中等级别，其中大多数为非特殊类型。HER-2 0组中有71.3%、HER-2 1 组中有68.7%、HER-2 2 / ISH阴性组中有72.5%的肿瘤属于中等分级。此外，HER-2 0组中82.8%、HER-2 1 组中83.6%、HER-2 2 /ISH阴性组中90%的肿瘤属于非特殊类型。如表2，不同HER-2 IHC评分类别的21基因复发评分（RS）分布没有明显差异。但需注意的是，与HER-2 0组相比，HER-2 2 /ISH阴性组基因检测的高风险（RS >25）比例更高（40.0% vs 35.2%，p=0.618）。根据结节受累情况或绝经状态进行分层后，未观察到明显差异。表2.根据HER-2 IHC评分确定基因组风险
所有病例中患者的HER-2基因阳性表达得分均未超过10.7，研究发现，HER-2基因表达为非正态分布，中位数9.20 [IQR：8.70-9.60]。在HER-2 0、1 和 2 /ISH阴性三个组别中，HER-2基因表达与HER-2 IHC评分呈正相关。其中，HER-2 0组的中位分值为8.90（IQR：8.5-9.28），而HER-2 1 组和HER-2 2 /ISH阴性组的中位分值分别为9.40（IQR：8.90-9.72）和9.51（IQR：9.30-10.0）。然而，在所有三个组别中观察到的得分有很大的重叠性（图2）。与HER-2 0和HER-2 1 相比，HER-2 2 /ISH阴性组的患者密度更高，这表明在HER-2 2 /ISH阴性组中，HER-2基因表达与HER-2 IHC评分间的关联更明显（图3）。
图2. 各IHC类别中HER-2基因表达的分布情况
在对年龄、绝经状态、肿瘤大小、PR表达、Ki-67和淋巴结受累等协变量进行调整后，发现与HER-2 0相比，HER-2 1 [OR 1.42 (95% CI：1.21-1.68)，p < 0.001]和HER-2 2 /ISH阴性[OR 1.96 (95% CI：1.61-2.37)，p < 0.001)]的HER-2基因表达与HER-2 IHC之间存在显著正相关。研究结果表明，HER-2基因表达与Ki-67水平升高之间存在统计学上的显著负相关[OR 0.98 (95% CI：0.969-0.982), p < 0.001)]。将HER-2 0分为HER-2阴性和HER-2超低组后，并未发现两个分组之间HER-2基因表达有明显差异。这表明，HER-2 mRNA在IHC染色极少或无染色的病例中分布相似。本研究中，HER-2 IHC评分增加，HER-2基因表达量也持续上升，尽管三个组（0、1 、2 /ISH阴性）间存在大量重叠，与HER-2 1 和HER-2 0相比，HER-2 2 /ISH阴性患者的HER-2基因表达中位数更高。在所有三组中观察到的评分重叠表明，HER-2基因表达与HER-2 IHC评分之间的相关性可能并不像传统假设的那样。所有病例的数值都低于临界值10.7，而且在对HER-2超低人群进行分组时，也没有观察到mRNA分布的差异。表明HER-2基因表达可能对识别HER-2蛋白表达水平过低的患者并不敏感。研究结果表明，无论是否按结节受累或绝经状态进行分层分析，不同的HER-2 IHC类别在21基因复发评分方面都没有统计学意义上的显著差异，这与其他研究结果一致。HER-2低表达对早期HR阳性/HER-2阴性疾病预后的影响取决于基因组风险，在基因组风险较高的女性患者中，与HER-2 0相比，HER-2低表达具有显著的优势。目前的研究结果强调了必须将ODX报告解释为一组综合数值，而不是单一的数值。值得注意的是，T-Dxd在HER-2低表达和HER-2阴性转移性乳腺癌中也有疗效，最佳总体缓解率为30.6% (95% CI：22.7–45.4)。但分子分析在HER-2表达水平较低的癌细胞中检测到T-DXd的摄取，而 HER-2缺失的细胞则没有表现出任何摄取。除回顾性和非随机评估的内在局限性外，结合定量和定性方法评估HER-2表达在建立结论性推论方面存在重大挑战，特别是在HER-2水平极低的乳腺癌病例中。分子分析的主要缺点是它缺乏对确定临界值的定量措施。相反，重点必须放在确定当前可用药物可以有效发挥作用的临界值上。因为评分的实际应用在临床实践中至关重要。IHC和分子分析的对比分析表明，21基因分析法(ODX)检测无法正确区分HER-2低表达和HER-2 0，IHC在HER-2阴性乳腺癌中识别这两种模式至关重要。抗体名称 | 产品编号 | 克隆号 | 注册证 |
HER-2 | Kit-0043 | MXR001 | 国械注准20193400435 |
M. Gaudio，F. Jacobs，C. Benvenuti，et al.Unveiling the HER2-low phenomenon: exploring immunohistochemistry and gene expression to characterise HR-positive HER2-negative early breast cancer.[J].Breast cancer research and treatment,2023.
原文附件：Unveiling the HER2-low phenomenon exploring immunohistochemistry and gene expression to characterise HR-positive HER2-negative.pdf
