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案例  某天在日常工作中收到一例胃液标本，镜下下图所示：   圆形、褐色、折光性差的为何物？红细胞？影红细胞？杂质？我看着像是被破坏的红细胞，经与同事们讨论之后大家一致认为是红细胞，翻来检验图谱经过查证确为红细胞，如下图所示：  胶体金法检测隐血为阴性。如果镜下真是红细胞的话，为啥隐血试验是阴性的？如果按隐血阴性报告的话，会严重影响临床对疾病的判断？  为什么镜下如此多的红细胞，隐血试验会是阴性呢？我们先从影响抗原抗体反应的因素说起吧。一是自身因素，抗体的浓度、特异性、亲和性，抗原表位的种类数目都影响反应结果。二是环境因素，电解质、酸碱度、温度。这么多的红细胞，会不会是带现象，也就是抗原量太大引起的，随即又用生理盐水稀释来检测，得到的还是阴性结果：  众所周知，胶体金单克隆抗体法灵敏度高、特异性强，那就考虑是环境因素引起的。抗原抗体最适温度15-40度，最适PH值6-9，用0.9%生理盐水做为稀释液，而正常胃液的PH值为0.9-1.8，考虑是PH值影响了检测结果。 将胃液的PH值用氢氧化钠调到7，复测得到结果如下：  还是阴性，想了一下，检测Hb还有一种方法，那就是试带法，随即把胃液离心取上清加盐水用干化学法（四甲基联苯胺法）进行复查，隐血3+，和镜下的大量红细胞完全契合。结果如下：   可算是把血红蛋白检测出来了，不过这也是浪费了太多的试剂了吧，不要紧，我们有高招，那就是它  此试剂为酶免法检测的底物液，底物液A的成分为过氧化氢，底物液B的成分为四甲基联苯胺，如果胃液中存在Hb，Hb中的亚铁血红素具有过氧化物酶活性，催化过氧化氢，释放出新生态氧，把受体四甲基联苯胺氧化成四甲基联苯胺蓝，显示蓝色。显色的深浅反映了血红蛋白的多少，即出血量的多少。如下图所示，左侧盐水对照，右侧为本实验：  总 结 胶体金法检测呕吐物最适pH值为7~8。pH过低Hb的抗原结合位点构象改变，患者血红蛋白的抗原与单克隆抗体不匹配，可引起假阴性，Hb在胃内停留时间过长被胃酸或在肠道中被蛋白酶降解，丧失免疫活性，Hb抗原决定簇会被降解或屏蔽，也可引起假阴性。当Hb浓度大于2000µg/ml时，抗原抗体比例不合适也可导致假阴性。 化学法检测Hb极为敏感，灵敏度较低，进食动物血液、铁剂、铋剂等氧化剂可造成假阳性。高浓度的维生素C可造成假阴性。胶体金特异性较高，化学法灵敏度较低，当两种检测结果不一致时，应结合患者的临床症状、体征病史和其他实验室检查及治疗反应等情况综合考虑。 作者:陈红芳 苏勇霏 赵虎 （河北省新乐市医院检验科） |
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