甲苯胺蓝DNA琼脂实验用途

　　品种名称：024025 甲苯胺蓝-DNA琼脂

　　品种用途：用于金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶的试验。

　　金黄色葡萄球菌是一种重要的人畜共患病病原,它能产生一种由nuc基因编码的胞外耐热核酸酶。耐热核酸酶是金黄色葡萄球菌的毒力因子之一,agr及sae位点是编码金黄色葡萄球菌的主要毒力调节因子,研究发现sae调节位点在影响耐热核酸酶的表达上占主导地位。分析金黄色葡萄球菌各毒力因子和金黄色葡萄球菌现有疫苗,为解决金黄色葡萄球菌的耐药性,寻找更好的防治方法,有必要进行探索性实验寻找一种因素或药物,用来阻抑sae调控因子对耐热核酸酶的分泌过程进行调节,从而为金黄色葡萄球菌的防治研究提供一种新材料。

　　使用原理：

　　具有脱氧核糖核酸酶的细菌分解培养基中的脱氧核糖核酸(DNA)，使DNA长链水解成数个单核苷酸的寡核苷酸短链，使指示剂甲苯胺蓝作用变成粉红色;氯化钙提供阳离子作为激活剂;氯化钠维持均衡的渗透压;三羟甲基氨基甲烷为缓冲剂;琼脂为培养基的凝固剂。

       图鉴：

        

 

　　培养基配方(每升)：

　　脱氧核糖核酸(DNA)0.3g

　　氯化钙0.0011g

　　氯化钠10g

　　甲苯胺蓝0.083g

　　三羟甲基氨基甲烷6.1g

　　琼脂10g

　　最终pH9.0±0.2

　　使用方法：

　　1、称取本培养基26.5g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，115℃高压灭菌15min(即用可不需灭菌)，备用。

　　2、载玻片的制备：取3mL甲苯胺蓝-DNA琼脂平铺于在载波片上制成标本，待琼脂凝固后，在琼脂上打成直径2mm的小洞(每个载玻片10-12个)，抽出小洞中的琼脂块。

　　3、从Baird-parker平板挑一个可疑单菌落接种普通肉汤培养基中，36±1℃培养20h～24h后，经过100℃沸水煮15min,取0.01mL接种所制备的载玻片上小洞，于35℃培养4h后，观察结果。

　　贮 存：贮存于避光、阴凉干燥处。贮存期三年。

　　规 格：100g