高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。  在工作中你是不是遇到了关于 HPLC的 各种恼人的问题?
不怕不怕,有一张神奇的表, 知道你所有的烦恼。。。
故障 | 现象 | 可能原因 | 解决方法 | 压力异常 | 无压力显示 无流动相流动 | 无法开机 | 1.电源问题:检测相应的电源配置; 2.未开机,打开电源; 3.保险丝被烧坏,更换保险丝; | 泵未启动 | 1.设置合适的泵的流量; 2.溶剂管理器中,设置充足的的溶剂余量; | 工作站未正常连接 | 仪器指示灯常亮 | 1.网线/USB线异常,更换网线/USB线; 2.工作站端口未设置,设置工作站端口; 网线:192.168.1.10; USB线:192.168.8.10; 3.电脑IP与工作站IP冲突,修改电脑IP为192.168.1.11 | 仪器状态灯闪烁 | 1.CAN线连接异常,重新插拔一下CAN线; 2.通讯板灯异常:备注1更换通讯板; | 柱塞杆折断 | 更换柱塞杆; | 泵头内有空气 | 1.溶剂脱气; 2.打开旁路放空阀,5mL/min高流量放空; | 流动相不足 | 补充流动相 | 过滤沉子堵塞 | 更换过滤沉子 | 单向阀损坏 | 更换单向阀 | 漏液 | 拧紧或更换相应漏液部件。 | 流动相流动正常 但没有压力显示 | 旁路放空阀组件损坏 | 更换旁路放空阀组件 | 压力持续偏高/ 不断升高 | 保护柱阻塞 | 清洗或更换保护柱 | 流速设定过高 | 调整流速设定 | 柱前筛板堵塞 | 1.在允许情况下反冲色谱柱; 2.更换筛板; 3.更换色谱柱; | 流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀 | 1.使用恰当的流动相; 2.冲洗色谱柱; | 色谱柱选择不当 | 选择恰当的色谱柱; | 进样阀损坏 | 清洗或更换进样阀; | 柱温过低 | 提高温度; | 工作站失常 | 1.工作站问题。更换工作站; 2.电脑版本和工作站冲突,更换推荐配置的电脑; | 在线过滤器阻塞 | 清洗或更换在线过滤器; | 压力持续偏低/ 不断下降 | 系统漏液 | 确定漏液位置并维修; | 流速设定过低 | 调整流速; | 色谱柱选择不当 | 选择恰当的色谱柱; | 柱温过高 | 降低温度; | 控制器失常 | 维修或更换控制器; | 工作站失常 | 1.工作站问题。更换工作站; 2.电脑版本和工作站冲突,更换推荐配置的电脑; | 压力波动 | 泵中有气体 | 1.溶剂脱气; 2.除去泵中气体; | 单向阀损坏 | 更换单向阀; | 泵密封损坏 | 更换密封圈; | 脱气不充分 | 1.溶剂脱气; | 2.改变脱气方法(使用在线脱气法等); | 系统漏液 | 确定漏液位置并维修; | 使用梯度洗脱 | 由于流动相粘度的变化引起的压力波动; | 漏液 | 接头处漏液 | 接头松动 | 拧紧; | 接头磨损 | 更换; | 接头过紧 | 1.拧松,再重新拧紧; 2.更换; | 接头被污染 | 1.拆下清洗; 2.更换; | 接头处连接管未正常连接 | 1.拧松接头,先将连接管固定或压到底,再拧紧接头; 2.韧环或连接管发生不可恢复的变形引起的漏液,更换韧环或连接管路; | 部件不匹配 | 使用同一品牌的配件; | 泵漏液 | 单向阀松动 | 1.拧紧单向阀(不必拧的过紧); 2.更换单向阀; | 接头松动 | 拧紧接头(不必拧的过紧); | 泵密封损坏 | 维修或更换泵密封圈; | 旁路放空阀组件损坏 | 1.拧紧旁路放空阀; 2.维修或更换旁路放空阀组件; | 比例阀损坏 | 1.检查隔膜,如果漏液立即更换; 2.检查手紧接头,损坏的立即更换; | 检测器漏液 | 流通池垫片损坏 | 1.避免过大的背景压力(压力降); 2.更换垫片; | 流通池窗破碎 | 更换窗口; | 手紧接头漏液 | 拧紧或更换; | 废液管阻塞 | 更换废液管; | 流通池阻塞 | 重新安装或更换; |
备注1:当仪器的CAN线都已经正常连接,且仪器处于打开状态,通讯板上的指示灯处于闪烁的状态。若通讯板上的指示灯不亮或常亮,为通讯板异常。通讯板的指示灯不亮,可能是通讯板未接通电源。检查仪器是否开机,CAN线是否有松动情况。若通讯板常亮,为通讯板异常,更换通讯板。 备注2:若输液泵中存在大量的气泡或新仪器安装时,使流动相充满溶剂瓶到输液泵的管路,并检查泵上各个接头处,确保仪器未漏液。然后将旁路放空阀上接到进样器的管路卸下,用堵头堵住。打开旁路放空阀,5mL/min的流量冲洗并隔个1min左右,将旁路防空阀旋紧2~3s观察工作站中的压力显示,压力不得超过25MPa,然后迅速旋松,不断循环此操作5min。将旁路放空阀到进样器的管路连接好,观察输液泵是否正常吸液或压力波动是否好转,若现象有好转,但仍然压力波动较大,则重复此操作至压力平稳。
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