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EGFR，表皮生长因子受体，是细胞表面的蛋白质，通常可以促进细胞的生长和分类。约50%的中国NSCLC（非小细胞肺癌）患者存在EGFR基因突变，其中，最常见突变类型19 deletion 和 L858R 约占 EGFR 突变的 90%，罕见突变约占10%，罕见突变中 G719X, S768I, L861Q又较为常见，约占 6-7%。 一代TKI药物吉非替尼（易瑞沙）、厄洛替尼（特罗凯）、埃克替尼——针对EGFR敏感突变。2018年发表在《Lancet Respiratory Medicine》杂志上的一篇前瞻性的、多中心的、临床II期实验研究，采用包含微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)在内等技术，证实ctDNA检测到的EGFR突变可用于指导吉非替尼用药[1]（点击查看文献解析） 二代TKI药物阿法替尼（Gilotrif）——2018年1月15日，美国FDA正式批准扩大阿法替尼的一线适应症范围，用于肿瘤具有非耐药性罕见EGFR突变（L861Q、G719X和/或S768I）的转移性NSCLC患者的治疗 三代TKI药物奥希替尼（泰瑞莎）——针对经EGFR-TKI治疗时或治疗后病情进展的T790M突变阳性NSCLC的靶向药 上述靶向药物通过靶向表皮生长因子受体（EGFR），抑制其功能，阻断EGFR信号通路，抑制肿瘤细胞增殖，产生抗肿瘤作用。 虽然第三代EGFR-TKI能改善EGFR T790M突变的NSCLC患者的预后，延长生存期，但由于肿瘤组织的复杂性以及肿瘤细胞的进化，耐药会无可避免的发生。2015年5月，就在美国批准上市后不久，哈佛大学Thress等研究工作者，通过联合ddPCR及二代测序技术发现一种奥希替尼获得性耐药机制，研究结果发表在《Nature Medicine》杂志上。文章指出，奥希替尼治疗后的进展患者中约40%会出现获得性C797S耐药突变，这是导致奥希替尼耐药的机制之一[2]。 2017年6月，广东省人民医院吴一龙教授团队在《Journal of Thoracic Oncology》杂志上发表了关于“一代和三代TKI联合用药有效治疗携带EGFR-T790M和反式C797S基因突变的腺癌患者”的研究成果[3]。近期，又在JTO上报道了该患者的后续治疗情况[4]。 C797S在NSCLC患者体内可能有下列三种突变形式，不同的形式下临床用药也是不同的。 ● C797S单一突变，不伴T790M突变 ● T790M C797S顺式突变（Cis）：T790M和C797S同时出现，且位于同一条等位基因上 ● T790M C797S反式突变（Trans）：T790M和C797S同时出现，且位于不同的等位基因上 如果T790M和C797S呈反式，则会对三代TKI耐药，但是对一代和三代TKI联合用药敏感；如果呈顺式，据报道可采用布加替尼联合EGFR-TKI药物克服此类耐药情况[5]；如果C797S突变单独存在，则对三代TKI耐药，但对一代TKI敏感。 1. 检测是否存在C797S突变，这个简单 2. 如何判断T790M C797S顺反式关系？ QX200 ddPCR系统的QuantaSoft软件独具Linkage Analysis功能，用于评估DNA序列上两个靶标位点的连锁情况。将此功能应用在上述需求中，即可以判断T790M和C797S两个突变的顺反式关系。其基本原理为：如果是顺式，则两种突变序列进入同一微滴的可能性更大，PCR扩增后微滴表现为双阳性，如下图1 所示；如果是反式， T790M和C797S突变各自随机进入微滴，双阳性微滴的产生也呈随机性，双阳性微滴的比例与样本的浓度正相关，如下图2所示。 ▲图1. 两个突变呈顺式关系，在微滴化过程中同时被包裹进微滴，使微滴呈双阳性 ▲图2. 两个突变呈反式关系，在微滴化过程中各自随机包裹进微滴，大多数微滴呈FAM或HEX单阳性。双阳性微滴的数量与突变丰度有关 Bio-Rad针对EGFR T790M C797S Cis/Trans研究提供Expert Design Assay，其中C797S 包含G>C和T>A两种突变形式，同时兼容组织样本和血液样本。 不久前，在美国亚特兰大举办的第110届美国癌症研究协会年会（AACR）上，美国Biodesix公司分享利用QX200 ddPCR技术检测血液EGFR T790M C797S顺反式突变，检测下限可低至0.02%。可用于查明对奥西替尼耐药的耐药机制，为部分耐药NSCLC患者治疗方案的调整提供指导。 订购信息 参考文献 [1] Jie Wang, Yi- long Wu et al. Detection of EGFR mutations in plasma circulating tumour DNA as a selection criterion for firs- line gefitinib treatment in patients with advanced lung adenocarcinoma (BENEFIT): a phase 2, single- arm, multicentre clinical trial. The Lancet Respiratory Medicine, 2018. [2] Thress, K.S. et al. Acquired EGFR C797S mutation mediates resistance to AZD9291 in non- small cell lung cancer harboring EGFR T790M. Nat Med. 2015 Jun;21(6):560-2. [3] Yi- long Wu et al. Brief Report: Lung adenocarcinoma harboring EGFR T790M and in trans C797Sresponds to combination therapy of first and third generation EGFR- TKIs and shifts allelic configuration at resistant. 2017. [4] Yi-long Wu et al. Re-emerging C797S In Trans and Rechallenge of Osimertinib With Erlotinib. 2019. [5] Wang X. et al. Lung Adenocarcinoma Harboring EGFR- 19del/C797S/T790M Triple Mutations Responds to Brigatinib and Anti-EGFR Antibody Combination Therapy. J Thorac Oncol. 2019 Jan 31. |
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