【原】realtime PCR样本收集注意事项

细胞 (收细胞之前确认上清是否需要留)

(1)    贴壁细胞

        吸掉培养基，PBS洗一次，吸掉PBS，加入1 mL  Trizol，将底部细胞吹打起来，转入1.5 mLEP管，裂解细胞，-80度冻存，干冰运输。

(2)    悬浮细胞

        将培养基及细胞转入1.5 mL EP管，5000转3 min离心，离心后吸掉上清，加入1 mL  Trizol，吹打混匀，裂解细胞，-80度冻存，干冰运输。

(3)     贴壁细胞和悬浮细胞混合

        将底部细胞吹打起来，转入1.5 mL EP管，5000转3 min离心，离心后吸掉上清，加入1 mL  Trizol，吹打混匀，裂解细胞，-80度冻存，干冰运输。

组织

        请提供不低于100 mg组织样本，-80度冻存，干冰运输。

血清、血浆

        血清或者血浆游离RNA的提取，需首先按照常规方法分离血清或者血浆（采血后24 h内分离），按照比例加入专用Trizol，推荐使用Invitrogen公司TRIzol® LS Reagent，-80度冻存，干冰运输。

全血

        1:3加入1×红细胞裂解液，裂解10 min，12000转3 min离心，倒掉废液，沉淀下来的外周血单个核细胞加入1mL  Trizol，吹打混匀，-80度冻存，干冰运输。

尿液

        按照比例加入专用 Trizol，推荐使用Invitrogen公司TRIzol® LS Reagent，-80度冻存，干冰运输。