我的观点是: 1、免疫荧光一般用新鲜组织的冰冻切片,效果很好,但避免反复冻融组织,否则抗原弥散和祖先细胞结构破坏;而石蜡切片一般用免疫组化的方法较好。但有人说国外现在有些实验室也用石蜡切片做免疫组化,前提是有高质量的一抗和荧光素标记的二抗等优良条件。 2、如果做定位,且只要你的抗体可以做IHC/IF,那我认为可以用免疫组化的方法做缓激肽(Bradykinin)在爬行动物生殖腺中的定位。 3、最后,我觉得你要抉择免疫组化和免疫荧光?如果是胞膜蛋白,建议用冰冻切片做免疫荧光分析,前提是组织新鲜取材,否则抗原弥散严重;如果是胞浆或胞核蛋白,可以用石蜡切片的免疫组化方法,只要你的抗体能够做石蜡切片免疫组化和适当的微波修复,效果还是可以的。 4、石蜡切片的优势在于组织细胞结构保存完整,但对抗原的损伤较大,尤其醛基对抗原决定族的封闭作用;而冰冻切片对抗原的保真较好,但反复冻融的组织切片,组织细胞形态结构不完好,进而影响定位。 |
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