【原】免疫组织化学技术原理介绍

免疫组化，免疫组织化学技术(immunohistochemistry，IHC)，也是是一项利用抗原抗体反应，通过使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原，对蛋白定位，定性的实验技术。免疫组化主要用的是组织标本和细胞标本两大类，组织标本包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片。石蜡切片，对组织形态保存好，保存时间也长，虽然对组织抗原暴露有影响，但可以抗原修复，所以石蜡切片仍然是首选的标本制作方法。

免疫组化流程如下：

举个例子：

在下面的这篇文章[3]中，作者通过对EOC（上皮卵巢癌）患者卵巢组织单细胞测序内容的分析确定了肿瘤细胞内两个亚群的生物标志物后（CYR61/RGS5），作者在8个卵巢癌样本中应用了CYR61和RGS5的IHC共染色，以验证样品制备和scRNA-seq的生信分析的可靠性。IHC结果证明，CYR61+肿瘤细胞和RGS5+CAFs的比例与scRNA-seq结果是一致的。

大家有没有觉得很熟悉？免疫组化和免疫荧光有点相似。下面我为大家总结一下两者的异同点。方便大家选择 。

相同点：

两者都是利用抗原抗体结合原理在蛋白层面进行研究。

不同点：

1、标本制作：免疫荧光一般用冰冻切片，减少杂质干扰；而酶免疫组化一般用石蜡切片或冰冻切片均可以。石蜡切片，对组织形态保存好，保存时间也长，所以石蜡切片仍然是免疫组化首选的标本制作方法。

2、实验步骤：免疫荧光染色步骤简单，而酶免疫组化方法较为复杂，多了DAB显色过程。3、标本保存：免疫荧光染色后的标本一般短时间拍照，时间长了荧光衰退；而酶免疫组化染色标本可以长期保存。

4、结果展示：免疫荧光得到的图片是彩色的，上档次。免疫组化结果除了知道蛋白是在细胞浆还是细胞膜表达高些，还可以用软件做相对定量分析。