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Cell Biolabs 羟脯氨酸检测试剂盒分析原理

 艾美捷科技 2022-02-11

羟脯氨酸是一种由不可逆的翻译后酶合成的氨基酸脯氨酸经脯氨酰羟化酶羟化。羟脯氨酸几乎只存在于细胞中蛋白质胶原蛋白,位于重复三肽Gly-X-Y的Y位置。通过允许胶原蛋白螺旋,羟脯氨酸有助于稳定胶原蛋白的结构。除了胶原蛋白,在转录因子缺氧诱导因子(HIF1)上观察到脯氨酸的羟基化。在正常氧气条件下,蛋白质EGLN1在脯氨酸564处羟基化HIF-1α,允许von Hippel-Lindau肿瘤抑制因子(pVHL)泛素化并导致靶向性通过蛋白酶体降解HIF-1。

由于羟脯氨酸仅存在于胶原蛋白以外的少数蛋白质中,因此羟脯氨酸已被用作量化胶原蛋白和/或明胶水平的标志物(部分胶原蛋白水解产生蛋白质和肽的混合物)。据估计羟脯氨酸占胶原蛋白的13.5%。此外,还使用了羟脯氨酸测量确定某些涉及胶原蛋白分解的疾病。例如,增加了在佩吉特骨病患者的血清中测定了胶原蛋白。此外,羟脯氨酸增加该水平与前列腺癌、骨转移、肝纤维化以及前列腺癌相关三聚氰胺和三聚氰酸引起肾毒性。

Cell Biolabs/羟脯氨酸检测试剂盒为检测提供了一种方便的比色方法从组织、血浆、血清或尿液酸水解物中提取总羟脯氨酸。首先是未知将样品或羟脯氨酸标准加入96孔板中。然后,加入氯胺T混合物添加以将羟脯氨酸转化为吡咯。最后,4-(二甲氨基)苯甲醛(DMAB)将混合物(也被称为埃利希试剂)添加到与吡咯反应的孔中,以使其反应产生生色团(下图),并在540-560 nm处读取板的吸光度。内容通过与预定值进行比较,确定未知样品中羟脯氨酸的含量羟脯氨酸标准曲线。提供的试剂足以评估96次分析包括标准品和未知样品。

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(分析原理)

1. STA-670: Homocysteine ELISA Kit

2. STA-671: S-Adenosylhomocysteine (SAH) ELISA Kit

3. STA-672: S-Adenosylmethionine (SAM) ELISA Kit

4. STA-674: Glutamate Assay Kit

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