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【求助】MCF-7细胞培养用的胰岛素配制方法

 微笑如酒 2022-06-22 发布于广东


请问,
1,所需用的胰岛素有没有什么物种差别?重组人胰岛素、牛胰岛素、猪胰岛素是不是都可以使用?
2,配制方法,说是酸性或碱性溶液。酸性要小于PH3。我现在有去年配制的胰岛素2.5mg/ml(酸性溶液,记得是Tris-HCl还是柠檬酸的,PH<3),现在配置到培养基MEM中至浓度0.01mg/ml(即40ul胰岛素母液加入10ml培养基),但是培养基严重偏酸,颜色偏黄。
考虑pH偏酸,会对细胞有影响。
如何配制、使用胰岛素?
现在我的MCF-7细胞生长缓慢,有轻微成团现象,1:3传代需要生长一周。

用0.01M柠檬酸缓冲液(PH2.0)溶解胰岛素,边溶解边用PH试纸检测PH,并将PH缓慢调节至2~3之间,4度放置半小时,若有沉淀析出,重新调节PH,若无,过滤,1ml分装冻存。用盐酸调PH

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