（尖端 | 女生）子宫内膜癌免疫组化P53判读

近年来，随着子宫内膜癌分子分型的应用和发展，对子宫内膜癌患者的诊断、治疗及预后管理产生了重要的影响。作为平替TP53基因检测的方法，P53蛋白免疫组化检测具有快速、准确、简便、经济等特点^[1]。尽管经过培训后对P53的判读可以达到较好的一致性，然而在实际工作中不同病理医生之间P53的判读结果仍然存在显著差异^[2]。

本文以2016/2018年加拿大卡尔加里大学Martin Köbel等发表的两篇论文为背景介绍P53免疫组化在子宫内膜癌中的判读^{[2, 3]}。

一

P53的免疫组化表达模式

 P53蛋白的免疫组化表达模式可以分为野生型、过表达型、完全缺失型、胞浆型4种类型。其中野生型表现为肿瘤细胞强弱不等的核阳（图1A），野生型P53的表达水平依赖于细胞的分化状态，并与增殖活性有关。过表达型表现为肿瘤细胞核强阳，且占比≥80%肿瘤细胞（图1B），尽管胞浆有轻微着色，但是不应该判读为胞浆型。完全缺失型表现为肿瘤细胞核完全不着色，同时内对照（正常腺体、淋巴细胞、成纤维细胞等）表达为强弱不等阳性（图1C）。胞浆型表现为肿瘤细胞胞浆强阳，同时胞核表现为强弱不等的野生型表达模式（图1D）。

图1.P53免疫组化表达模式.野生型（A），过表达型（B），完全缺失型（C），胞浆型（D）.

与P53表达模式相对应的TP53基因突变情况解读见表1^[3]。

表1.P53免疫组化染色模式及解读

此外，在少数子宫内膜癌病例中可能发现P53肿瘤异质性表达的情况，即在野生型背景下出现异常表达的情况。

建议不要将P53 IHC只报告为阳性/阴性，而应报告为野生型或突变型/异常表达，同时对后者表达模式做出描述（过表达型/胞浆型/完全缺失型），如P53（突变型/异常表达，过表达型）。

二

P53判读难点——“高表达”野生型

• 表达模式：整体染色强，可伴有胞浆染色深，易误判为“过表达型”（图2A, B）；

• 原因分析：肿瘤高增殖状态，总体染色较强等；

• 判读要点：染色模式总体表现为强弱不等，总体强阳的核染色比例应＜80%；肿瘤间质细胞较强的染色模式可以作为参照；

图2.图为肿瘤细胞核在强弱不等阳性背景下，整体染色较强。细胞质泛红，提示染色过浓。

三

P53判读难点——“低表达”野生型

• 表达模式：整体染色弱，易误判为“完全缺失型”（图3）；

• 原因分析：肿瘤细胞低增殖，总体染色弱，抗体降解等；

• 判读要点：内对照很重要，当间质细胞染色为阴性时，不应该解读为“完全缺失型”；

图3.图为同一病例不同平台染色结果：（左）弱阳，但间质细胞无着色; （右）为强弱不等核阳的野生型。

四

P53判读难点——“低表达”过表达型

• 表达模式：整体染色弱，或局灶肿瘤细胞表现为强弱不等核阳，易误判为“野生型”（图4）；

• 原因分析：抗体降解，剪切变异，整体染色弱等；

• 判读要点：总体强阳的核染色比例应≥80%；肿瘤间质细胞较弱的染色模式可以作为参照；

图4. 图为P53过表达型病例，局灶区域出现强弱不等核阳（右下角缩略图为其他区域的表达模式）。

五

P53判读难点——胞浆型

• 表达模式：肿瘤细胞胞浆呈中-强阳，伴胞核强弱不等阳。当“野生型”或“过表达型”胞浆染色较强时易与之混淆（图5,6）；

• 原因分析：TP53基因核定位结构域损坏；

• 判读要点：在没有背景非特异性着色的前提下，胞浆染色强度至少为中等强度。核染色的强度可以缺失或强弱不等，但不能弥漫强阳；

图5.（C）为P53胞浆型染色模式，肿瘤细胞胞浆中-强阳，伴胞核强弱不等阳；（D）为P53野生型染色模式，伴胞浆弱阳着色，可能为显色过强所致，不应判读为胞浆型。

图6. 两例高级别浆液性癌的P53 IHC染色. （左）图上半部分肿瘤细胞胞浆强阳着色, （右）图胞浆（甚至间质）中-强阳着色，但细胞核均为弥漫强阳，此时应判读为过表达型，而不是胞浆型。

六

P53异质性表达

• 表达模式：肿瘤细胞P53呈现多种染色模式（图7）；

• 原因分析：TP53基因亚克隆突变、肿瘤基因突变“二次打击”等；

• 判读要点：注意甄别因样本抗原保存不好（固定不好）导致的染色不均匀；这种表达模式在高级别浆液性癌中少见（＜3%），而在其他肿瘤类型中较易见； 

图7. P53异质性表达。（A）图示野生型（左上）伴过表达型（右下）；（B）图示野生型（下），伴过表达型（右上）与完全缺失型（左下）；（C）图示野生型（右）伴过表达型（左）；（D）图示野生型（右），伴过表达型（中）与完全缺失型（左）。

免疫组化P53判读结果对高级别浆液性癌的诊断、子宫内膜癌分子分型及辅助治疗方式的选择非常重要，因此病理医生在判读过程中应该引起重视。

当免疫组化P53表达模式判读困难时，建议认真检查内、外对照着色情况及质控条件，避免错误判读为突变型/异常表达模式。突变型表达模式的P53往往提示临床存在TP53致癌性突变，而P53的野生型模式存在约15%的非判读因素引起的不符合率。

_{目前免疫组化P53的主要应用目的在于预测有无TP53基因致癌性突变，而不是具体做出某种突变的判读。当P53免疫组化判读结果与TP53基因检测结果不一致时，在质控合格的前提下，应该以TP53基因检测结果为准。}

参考文献

[1]Vermij L, Léon-Castillo A, Singh N, et al. P53 immunohistochemistry in endometrial cancer: clinical and molecular correlates in the PORTEC-3 trial. Mod Pathol. 2022. 35(10): 1475-1483.

[2]Köbel M, Ronnett BM, Singh N, Soslow RA, Gilks CB, McCluggage WG. Interpretation of P53 Immunohistochemistry in Endometrial Carcinomas: Toward Increased Reproducibility. Int J Gynecol Pathol. 2019. 38 Suppl 1(Iss 1 Suppl 1): S123-S131.

[3]Köbel M etc. Interpretation of P53 Immunohistochemistry In Tubo-Ovarian Carcinoma: Guidelines for Reporting. Int J Gynecol Pathol. 2016.