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一、荧光图。RGB色彩格式包括了红绿蓝三色，是组合色，不能直接分析的，需要将它分离成8bit的格式，变成灰度图，才能分析。接下来一步叫做筛选分析区域，需要用Adjust里的threshold功能来截取区域，先设置肉眼看起来比较亮的图片的截取区域。第二步和荧光图分析一样，截取分析的区域，但是胶图截取的工具在“gel”选项中，先用矩形框勾出看上去... 阅64 转1 评0 公众公开 19-01-09 00:01 |
ImageJ分析免疫组化图片（附ImageJ的多种实用技巧）ImageJ软件中OD值与灰度值如何转换？此时灰度值255变成了OD值0，灰度值0变成了OD值2.71:再次以小鼠肺免疫组化染色为例，将鼠标放于下图十字处可在红框处得到图片的OD值为0，括号内为对应灰度值为255，OD值为0说明空白背景处没有任何阳性物质.此外灰度为0（纯黑处）OD值为2.71：因此，免疫组化... 阅18328 转67 评0 公众公开 18-11-24 19:15 |
像老板汇报课题的正确姿势。但去中科院抓10个学生，10都会知道，组会又叫工作汇报，所有学生向老板汇报自己一段时间内的进展，由老板对每个人的工作进行评价，然后给出下一步工作的指示。这样的汇报，导师一头雾水同学一脸懵逼，对你自己也毫无帮助。从导师或者师兄师姐的评价中，才是工作汇报应该学习的地方。指望通过工作汇报导师帮你做实验... 阅100 转2 评0 公众公开 18-10-12 16:02 |
做个qPCR还什么熔解不熔解的……杀姐姐：小林子说的是所谓的熔解曲线，熔解曲线是SYBR Green法的qPCR过程中较为常见的一种方法。首先我们来看看什么是SYBR Green法的qPCR，SYBR Green其实和EB差不多，都是结合到双链DNA的小沟中才能发出荧光。DNA还有一个特性，就是有一个温度，称之为退火温度，在这个温度下，双链的DNA，会解链一半。由于Taqm... 阅334 转10 评0 公众公开 18-10-03 20:14 |
qPCR，那些你不知道的不靠谱小秘密……在这篇关于qPCR测评的文献里，我们来看看qPCR到底有多不靠谱。这是一篇简单的qPCR测评，测试了简单的两种qPCR试剂和qPCR仪，分别是A某和罗某。A某有一种qPCR仪，叫7X00，罗某的qPCR仪叫LC4X0（这里还分成了4X0FP和4X0SDM）。还是不死心的作者，用A某的试剂盒配套罗某的qPCR仪来实验，终于，ID-1扩增出来了... 阅2116 转7 评0 公众公开 18-10-03 20:14 |
1. 裁一张相当于PVDF膜2.5倍面积的保鲜膜（保鲜膜就用的妙洁的，没有拍照）。2. 将PVDF膜平铺在保鲜膜上，取ECL发光液A、B各400ul充分混匀后滴于PVDF膜上（视条带多少调整用量，一般1ml足够）。左边是没有保鲜膜的乌漆嘛黑的条带，右边是使用保鲜膜简简单单的结果，为了显示出效果选的是曝光80s的图。师姐过来教我的那次，条带很浅曝光时间长膜... 阅388 转4 评0 公众公开 18-10-03 19:52 |
可能你会比较难理解，为什么用CRISPR能筛选基因，其实很简单，首先把所有的基因片段变成sgRNA的文库，弄到慢病毒，整合上Cas9之类的CRISPR部件。因为感染病毒后，细胞理论上对单个基因进行了敲减，这样的话，如果是关键基因，那细胞就挂了，细胞如果挂了的话，通过慢病毒整合上去的sgRNA就也没了，那用二代测序去检测sgRNA的拷贝数，看看这些sg... 阅117 转5 评0 公众公开 18-10-03 19:50 |
Beacon是茎环结构的探针，在杂交后，探针的茎部打开，结合到产物上，打开后的荧光基团会和淬灭基团分开，产生荧光。FRET也是一种杂交探针，这个挺复杂，用的是能量的转移，这需要两个探针来完成，前部的探针的3’末端结合一个荧光基团，后部探针的5’末端结合另一个荧光基团，第一个荧光基团的发射光就是第二个荧光基团的激发光，也就是你点了... 阅68 转2 评0 公众公开 18-10-03 18:28 |
为什么我的qPCR每次结果都不太一样？！qPCR是不是会做不好呢？第二点做不好的原因的RNA的降解，当然也就是RNA完整性的问题，RNA的完整性，一般体现在电泳过程中18S和28S的亮度上，如果这两个条带的RNA亮度变低，甚至没有，就说明RNA的完整性应该会有损失。（但实际上现在没人去跑电泳）导致RNA完整性受损的原因有很多，比如：于是有人做了这样... 阅3242 转6 评0 公众公开 18-10-03 18:27 |
同学，WB的灰度值测量再了解一下？前者A是没有转化为灰度模式的，后者B是灰度模式下的。至此条带上的灰度值就成了越亮越白则灰度值越大（有没有小伙伴看过那种原始照片底片，记不记得底片上人物的头发都是白的发亮，这种就是灰度值255哦；1、由于Photoshop得出的灰度值是平均灰度值，而在比较WB条带灰度值时，我们还应考虑面积的关系，以面积与... 阅111 转0 评0 公众公开 18-10-03 18:20 |
